MSN交谈
您所在位置：产品搜索
请输入产品关键字：
联系方式
技术文章
gⅥ-cDNA噬菌粒文库小规模的获取和纯化
点击次数：448 发布时间：2011-1-25
[器材和试剂]
●通用设备及试剂以及以下的设备和试剂：
●无菌96孔带盖培养板（Costar）
●LBAT
●R408辅助噬菌体（Stratagene）
●振荡孵育箱
●96孔复制板
●PEG/NaCl（
●PBS
[方法]
1．将克隆体接种到100ul LBAT 96孔培养板上，并在37℃过夜振荡培养（180r/min）。
2．使用96孔复制板将其接种到装有200ul LBAT的第二块96孔培养板上，在37℃培养直到生长中期（大约1，5小时）。
3．在每一孔中加入10ul 2×1011TU/mlR408辅助噬菌体。
4．37℃无振荡培养30分钟。
5．37℃过夜振荡培养。
6．4℃800g离心20分钟，收集细胞。
7．将上清液转移到一新的96孔培养板上，并加40pul PEG/NaCl。
8．将板放置于冰上1小时。
9．4℃800g离心20分钟，收集噬菌体颗粒，小心除去上清液，在50ulPBS溶液中打散颗粒。