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补体B因子(Bf)遗传多态性的检测
点击次数:515 发布时间:2011-1-25
1.原理与方法基本上和C4高压电泳及免疫固定技术一致,样本不需经神经氨酸酶和羧肽酶B处理,电泳时直接加10uL EDTA抗凝血浆。凝胶板规格为125mmX260mmX3mm,电泳时电压控制在85mA,时间3~4h或血红蛋白迁移至离加样孔5.5em处时,停止电泳。用1:4或1:2稀释的抗Df血清(AtlanticAntibodiesTATB,USA或上海长征医院产品)进行免疫固定。依照Mauff提出的BF定型图命名。
2.所需试剂 *缓冲液:*34。56g,NaOH6.00g,*1.23g,加蒸馏水至
2Lo此溶液为电泳缓冲液。
1%琼脂糖的配制:称取1.0g琼脂糖(1CN或SEAKEM.M.E)加*缓冲液66mL,然后加蒸馏水至100mL,隔水煮沸或微波炉中加热至琼脂糖*溶解透明为止。
3.操作 同C4免疫固定。