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上海酶联生物研究所
上海酶联生物研究所
阅读：421发布时间：2012-9-3
人IgA型抗内皮细胞抗体ELISA试剂盒
本试剂仅供研究使用 标本：血清或血浆
试验原理：
AECA-IgA试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验（ELISA）.已知AECA-IgA浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将AECA-IgA和*标记的抗体同时温育。洗涤后，加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤，去除未结合的酶结合物，然后加入底物A、B，和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中AECA-IgA的浓度呈比例关系。
自备材料
蒸馏水。
加样器：5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。
振荡器及磁力搅拌器等。
安全性
避免直接接触终止液和底物A、B。一旦接触到这些液体，请尽快用水冲洗。
实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。
不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。
人IgA型抗内皮细胞抗体ELISA试剂盒
操作注意事项
试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。
实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。
不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。
使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器。
使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。
洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
底物A应挥发，避免长时间打开盖子。底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。避免用手接触，有毒。实验完成后应立即读取OD值。
加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应板孔温育的时间一样。
按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
样品收集、处理及保存方法
血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后，1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
血浆-----EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。
细胞上清液---1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。
组织匀浆-----将组织加入适量生理盐水捣碎。1000×g离心10分钟，取上清液
保存------如果样品不立即使用，应将其分成小部分-70 ℃保存，避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒，检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
人IgA型抗内皮细胞抗体ELISA试剂盒
操作步骤
使用前，将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫，以免加样时加入大量的气泡，产生加样上的误差。
根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定，能使用复孔的尽量做复孔。标本用标本稀释液1：1稀释后加入50ul于反应孔内。
加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的*标记的抗体。盖上膜板，轻轻振荡混匀，37℃温育1小时。
甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。
每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP，轻轻振荡混匀，37℃温育30分钟。
甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。
每孔加入底物A、B各50ul，轻轻振荡混匀，37℃温育10分钟。避免光照。
取出酶标板，迅速加入50ul终止液，加入终止液后应立即测定结果。
在450nm波长处测定各孔的OD值。
6号标准品以上的结果为非线性的，根据此标准曲线无法得到的结果。
试剂盒性能
1. 灵敏度：zui小的检测浓度小于1号标准品。稀释度的线性。样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990。
2. 特异性：不与其它细胞因子反应。
3. 重复性：板内、板间变异系数均小于10%。
人IgA型抗内皮细胞抗体ELISA试剂盒
结 果 判 断 与 分 析
1、仪器值：于波长450nm的酶标仪上读取各孔的OD值
2、以吸光度OD值为纵坐标（Y），相应的AECA-IgA标准品浓度为横坐标（X），做得相应的曲线，样品的AECA-IgA含量可根据其OD值由标准曲线换算出相应的浓度。
3、检测值范围：0-800ng/ml
4、敏感度： 1.0 ng/ml
OVA/APC 荧光素APC标记鸡卵白蛋白 0.1ml
HSA（Human serum albumin）/APC 荧光素APC标记* 0.1ml
AACT/APC 荧光素APC标记胰* 0.1ml
Goat anti-human Fibrinogen/APC 荧光素APC标记羊抗* 0.1ml
ILTV（Infectious Laryngotracheitis Virus） 抗鸡传染性喉气管炎病毒抗体 0.2ml
ING1/p33（inhibitor of growth gene 1） 生长抑制因子基因1抗体 0.2ml
IMP3（Insulin like growth factor 2 mRNA binding protein 3） 胰岛素样生长因子ⅡmRNA结合蛋白3抗体 0.2ml
Inhibin α 抑制素α抗体 0.2ml
Inhibin beta A（Activin A activin AB alpha polypeptide; Activin A） 抑制素beta A抗体 0.2ml
Inhibin beta B 抑制素βB抗体 0.2ml
Insulin 胰岛素抗体 0.1ml
Goat anti-human IgG/Alexa Fluor 350 Alexa Fluor 350标记羊抗人IgG 0.1ml
Goat anti-bovine IgG/Alexa Fluor 350 Alexa Fluor 350标记羊抗牛IgG 0.1ml
Insulin 胰岛素抗体 0.2ml
Insulin Receptor-α（ISR-α） 胰岛素受体-α抗体 0.1ml
Insulin Receptor-α（ISR-α） 胰岛素受体-α抗体 0.2ml
Integrin α3/CD49c（Integrin alpha 3） 整合素α3抗体 0.1ml
Integrin α3/CD49c（Integrin alpha 3） 整合素α3抗体 0.2ml
Integrin β5 整合素β5抗体 0.1ml
Integrin alpha 1 整合素α1抗体 0.1ml
Rabbit anti-Dog IgG/APC 荧光素APC标记兔抗狗IgG 0.1ml
Rabbit anti-Rat IgG/APC 荧光素APC标记兔抗大鼠IgG 0.1ml
Integrin β7 整合素β7抗体 0.1ml
L-Citrulline 抗L-瓜氨酸抗体 0.2ml
LDH（Lactate Dehydrogenase） 抗乳酸脱氢酶抗体 0.2ml
Lectin （Mannan-binding lectin; L-MBP） 抗凝集素抗体 0.2ml
Integrin αVβ1（Integrin alpha V + beta 1） 整合素αVβ1抗体 0.2ml
Integrin αVβ3（Integrin alpha V+beta 3/CD51+CD61） 整合素αVβ3抗体 0.2ml
Integrin αVβ5 （Integrin alpha V + beta 5） 整合素αVβ5抗体 0.2ml
Integrin αE/CD103 整合素αE抗体 0.2ml
IQGAP1（IQ motif containing GTPase activating protein 1） 支架蛋白抗体 0.2ml
IRF-1（Interferon regulatory factor-1） 干扰素调节因子抗体 0.2ml
human CD71 Monoclonal antibody/FITC 荧光素FITC 标记的抗人CD71 单抗 100T
human IgG Monoclonal antibody/FITC 荧光素FITC 标记的抗人IgG 单抗 100T
IRAK4（IL-1 Receptor-associated Kinase 4） 白介素-1受体相关激酶4抗体 0.2ml
IL-1Rα （Interleukin-1 receptor antagonist） 白介素-1受体拮抗剂抗体 0.2ml
Rabbit anti-bovine IgG/Gold 金标记兔抗牛IgG（10或15nm） 1ml
Rabbit anti-Bovine IgM/Gold 金标记兔抗牛IgM （10或15nm） 2ml
IL-1RⅠ（interleukin-1 receptor Ⅰ） 白介素1受体Ⅰ抗体 0.1ml
IL-1RⅠ（interleukin-1 receptor Ⅰ） 白介素1受体Ⅰ抗体 0.2ml
IL-1RⅡ（interleukin-1 receptor Ⅱ） 白介素1受体Ⅱ抗体 0.2ml
IRF-4（Interferon regulatory factor 4） 干扰素调节因子4抗体 0.2ml
ILT2/CD85j（Immunoglobulin-like transcript 2） 细胞表面免疫球蛋白样转录因子2抗体 0.2ml
IRS P53 （Insulin receptor substrate P53） 胰岛素受体底物p53蛋白抗体 0.1ml
IRS P53 （Insulin receptor substrate P53） 胰岛素受体底物p53蛋白抗体 0.2ml
IRS-1 胰岛素受体底物-1抗体 0.2ml
IRS-2 胰岛素受体底物-2抗体 0.2ml
IRS-3 胰岛素受体底物-3抗体 0.2ml
IRS-4 胰岛素受体底物-4抗体 0.2ml
ISR-α （Insulin Receptor-α） 胰岛素受体-α抗体 0.1ml
ISR-α （Insulin Receptor-α） 胰岛素受体-α抗体 0.2ml
ISR-β （Insulin Receptor-β） 胰岛素受体-β抗体 0.2ml
ISR（Insulin Receptor）（hu, cattle, mo, rat, horse, sheep, Rb, dog, chi） 胰岛素受体抗体 0.1ml
ISR（Insulin Receptor）（hu, cattle, mo, rat, horse, sheep, Rb, dog, chi） 胰岛素受体抗体 0.2ml
Integrin α4/CD49d（Integrin alpha 4） 整合素α4抗体 0.1ml
Integrin α4/CD49d（Integrin alpha 4） 整合素α4抗体 0.2ml
Integrin a7（integrin alpha 7） 整合素α7抗体 0.2ml
Integrin β1/CD29（integrin beta 1） 整合素β1抗体 0.1ml
Integrin β1/CD29（integrin beta 1） 整合素β1抗体 0.2ml
商铺：https://www.hbzhan.com/st32881/
主营产品：ELISA试剂盒，人ELISA试剂盒，小鼠ELISA试剂盒，豚鼠ELISA试剂盒，兔ELISA试剂盒，羊ELISA试剂盒，牛ELISA试剂盒，鸡ELISA试剂盒，鸭ELISA试剂盒，植物ELISA试剂盒
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