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上海酶联生物研究所
上海酶联生物研究所
阅读：134发布时间：2012-9-12
人抗*ⅢELISA检测试剂盒
试验原理：
AT-Ⅲ 试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验（ELISA）.已知AT-Ⅲ 浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将AT-Ⅲ 和*标记的抗体同时温育。洗涤后，加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤，去除未结合的酶结合物，然后加入底物A、B，和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中AT-Ⅲ 的浓度呈比例关系。
自备材料
蒸馏水。
加样器：5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。
振荡器及磁力搅拌器等。
安全性
避免直接接触终止液和底物A、B。一旦接触到这些液体，请尽快用水冲洗。
实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。
不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。
人抗*ⅢELISA检测试剂盒
操作注意事项
试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。
实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。
不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。
使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器。
使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。
洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
底物A应挥发，避免长时间打开盖子。底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。避免用手接触，有毒。实验完成后应立即读取OD值。
加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应板孔温育的时间一样。
按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
样品收集、处理及保存方法
血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后，1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
血浆-----EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。
细胞上清液---1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。
组织匀浆-----将组织加入适量生理盐水捣碎。1000×g离心10分钟，取上清液
保存------如果样品不立即使用，应将其分成小部分-70 ℃保存，避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒，检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
人抗*ⅢELISA检测试剂盒
操作步骤
使用前，将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫，以免加样时加入大量的气泡，产生加样上的误差。
根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定，能使用复孔的尽量做复孔。标本用标本稀释液1：1稀释后加入50ul于反应孔内。
加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的*标记的抗体。盖上膜板，轻轻振荡混匀，37℃温育1小时。
甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。
每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP，轻轻振荡混匀，37℃温育30分钟。
甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。
每孔加入底物A、B各50ul，轻轻振荡混匀，37℃温育10分钟。避免光照。
取出酶标板，迅速加入50ul终止液，加入终止液后应立即测定结果。
在450nm波长处测定各孔的OD值。
局限
6号标准品以上的结果为非线性的，根据此标准曲线无法得到的结果。
试剂盒性能
1. 灵敏度：zui小的检测浓度小于1号标准品。稀释度的线性。样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990。
2. 特异性：不与其它细胞因子反应。
3. 重复性：板内、板间变异系数均小于10%。
人抗*ⅢELISA检测试剂盒
结 果 判 断 与 分 析
1、仪器值：于波长450nm的酶标仪上读取各孔的OD值
2、以吸光度OD值为纵坐标（Y），相应的AT-Ⅲ 标准品浓度为横坐标（X），做得相应的曲线，样品的AT-Ⅲ 含量可根据其OD值由标准曲线换算出相应的浓度。
3、检测值范围：0-1600mg/L
4、敏感度： 1.0 mg/L
2,4-Dichlorophenoxy acetic acid, sodium salt, monohydrate 2,4-二氯苯氧基乙酸钠 [2702-72-9] 500g
4,6-Dichloropyrimidine 4.6－二氯嘧啶 [1193-21-1] 100g
2,6-Dichloroquinone-4-chlorimide 2，6-二氯醌-4-氯亚胺 [101-38-2] 5g
Dicyandiamide 二氰二胺 [461-58-5] 250g
Dicyclohexylamine nitrite 亚硝酸二环己胺 [3129-91-7] 100g
Dicyclohexylcarbodiimide 二环己基碳二亚胺 [538-75-0] 100g
Diethanolamine 二乙醇胺 [111-42-2] 500g
Diethylamine hydrochloride 二乙胺盐酸盐 [660-68-4] 50g
2-Diethyl aminoethyl hexanoate 胺鲜脂 [10369-83-2] 100g
Diethyldithiocarbamic acid sodium salt 铜试剂; 二乙基二硫代氨基甲酸钠 [20624-25-3] 100g
Diethyldithiocarbamic acid silver salt 砷试剂 [1470-61-7] 5g
Diethylene glycol 二乙二醇 [111-46-6] 500ml
Fast red TR salt 固红TR / 5g
Fenbendazole 苯硫咪唑 [43210-67-9] 100g
Ferrozine 菲洛嗪 [69898-45-9] 1g
Diethyl （ethoxymethylene）malonate 乙氧基甲叉基丙二酸二乙酯 [87-13-8] 500ml
Diethyl maleate 马来酸二乙酯 [141-05-9] 500ml
Diethyl oxalate 草酸乙酯 [95-92-1] 500ml
N,N-Diethyl-p-phenylenediamine hemioxalate salt N,N-二乙基对苯二胺草酸盐 [62637-92-7] 25g
N，N-Diethyl-p-phenylenediamine sulfate N,N-二乙基对苯二胺硫酸盐 [6283-63-2] 25g
N，N-Diethyl-p-phenylenediamine sulfate N,N-二乙基对苯二胺硫酸盐 [6283-63-2] 100g
Diethyl phthalate 邻酞酸二乙酯 [84-66-2] 100ml
Diethyl suberate 辛二酸二乙酯 [2050-23-9] 50ml
Diethyl succinate 丁二酸二乙酯 [123-25-1] 500ml
Diethyl sulfate 硫酸乙酯 [64-67-5] 500ml
Digitonin-Water-soluble 水溶毛地黄皂苷; 洋地黄皂苷 [11024-24-1] 100mg
Dihydrocytochalasin B 二氢细胞松弛素 [39156-67-7] 1mg
Dihydrostreptomycin, sesquisulfate salt 双氢* [5490-27-7] 25g
1,3-Dihydroxyacetone dimmer（DHA） 二羟基丙酮 [62147-49-3] 25g
1,3-Dihydroxyacetone dimmer（DHA） 二羟基丙酮 [62147-49-3] 100g
商铺：https://www.hbzhan.com/st32881/
主营产品：ELISA试剂盒，人ELISA试剂盒，小鼠ELISA试剂盒，豚鼠ELISA试剂盒，兔ELISA试剂盒，羊ELISA试剂盒，牛ELISA试剂盒，鸡ELISA试剂盒，鸭ELISA试剂盒，植物ELISA试剂盒
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