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上海酶联生物研究所
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阅读：511发布时间：2012-2-3
免疫扩散技术(immunodiffusion)是抗原或抗体成分的定性与定量分析方法,其基本原理是抗原-抗体结合形成复合物,在抗原和抗体量足够大并且比例适当时形成肉眼可见的沉淀。通常采用半固态透明琼脂凝胶作为支持介质,在凝胶中打孔装入抗原(或抗体),抗原与抗体在介质中扩散并相遇,如能够互相结合则在介质中形成沉淀弧带。单向扩散法(radial immunodiffusion):在含有抗体的凝胶中挖一小槽,注入抗原,使其扩散,如抗原与凝胶中的抗体发生反应形成环状乳白色沉淀带。双向扩散法:在凝胶板中,打孔后挖几个小槽;分别滴加抗原与抗体,让其互相扩散,互相反应形成沉淀线。
免疫电泳( immunoelectrophoresis)系鉴定与分离可溶性抗原成分的技术。将待分析的物质置于琼脂凝胶板上进行电泳分离成区带,然后在电泳移动轴相对的方向加入抗血清进行扩散。抗原与抗体结合后在特定的位置上形成沉淀线。
溶血空斑试验( hemolytic plaque assay)是一种计数细胞悬液中抗体生成细胞(浆细胞)的技术。把抗体产生细胞与高密度羊红细胞悬液细胞相混,再把混合细胞均匀地悬于半固体琼脂培养基中。几小时后,琼脂上加一层新鲜血清以提供补体。结合了浆细胞分泌抗体的红细胞随之被补体所溶解,在红色背景上可见透亮空斑,可依此计数细胞悬液中分泌抗羊红细胞IgM抗体的细胞。为检测分泌抗羊红细胞IgG抗体的细胞,需加入抗IgG抗体，以使羊红细胞在加入补体后被溶解。将半抗原、多糖或蛋白抗原结合于羊红细胞表面,可用以计数分泌抗这些物质的抗体细胞。也可用此方法测定抗体产生细胞分泌免疫球蛋白的种类。
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