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上海酶联生物研究所
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阅读：294发布时间：2013-11-28
上海酶联生物研究所
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试验原理：
IL-15试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验（ELISA）.已知IL-15浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。ELISA 检测试剂盒先将IL-15和*标记的抗体同时温育。洗涤后，加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤，去除未结合的酶结合物，然后加入底物A、B，和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中IL-15的浓度呈比例关系。
自备材料
1． 蒸馏水。
2． 加样器：5ul、10ul、50ul、100ul、200、500ul、1000ul。
3． 振荡器及磁力搅拌器等。
安全性
1． 避免直接接触终止液和底物A、B。一旦接触到这些液体，请尽快用水冲洗。
2． 实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。
3． 不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。
操作注意事项
1． 试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。
2． 实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。
3． 不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。
4． 使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器。
5． 使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。
6． 洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
7． 底物A应挥发，避免长时间打开盖子。底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。避免用手接触，有毒。实验完成后应立即读取OD值。
8． 加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应板孔温育的时间一样。
9． 按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
样品收集、处理及保存方法
1、 血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后，1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2、 血浆-----EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。
3、 细胞上清液---1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4、 保存------如果样品不立即使用，ELISA 检测试剂盒应将其分成小部分-70 ℃保存，避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒，检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
试剂的准备
1． 标准品：标准品的系列稀释应在实验时准备，不能储存。稀释前将标准品振荡混匀。稀释比例按下表中进行：
2． 洗涤缓冲液（50×）的稀释：蒸馏水50倍稀释。
操作步骤
1． 使用前，将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫，以免加样时加入大量的气泡，产生加样上的误差。
2． 根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定，能使用复孔的尽量做复孔。
3． 加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的*标记的抗体。盖上膜板，轻轻振荡混匀，37℃温育1小时。
4． 甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。
5． 每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP，轻轻振荡混匀，37℃温育30分钟。
6． 甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。
7． 每孔加入底物A、B各50ul，轻轻振荡混匀，37℃温育10分钟。避免光照。
8． 取出酶标板，迅速加入50ul终止液，加入终止液后应立即测定结果。
9． 在450nm波长处测定各孔的OD值。
局限
6号标准品以上的结果为非线性的，根据此标准曲线无法得到的结果。
试剂盒性能
1. 灵敏度：zui小的检测浓度小于1号标准品。稀释度的线性。样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990。
2. 特异性：不与其它细胞因子反应。
3. 重复性：板内、板间变异系数均小于10%。
结果 判 断 与分析
1、仪器值：于波长450nm的酶标仪上读取各孔的OD值
2、以吸光度OD值为纵坐标（Y），ELISA 检测试剂盒相应的IL-15标准品浓度为横坐标（X），做得相应的曲线，样品的IL-15含量可根据其OD值由标准曲线换算出相应的浓度。
3、检测值范围：0-800pg/ml
4、敏感度： 1.0 pg/ml
Y142313 * 鉴别用 -20℃，避光 1.6PNA单位/支 140731-200501
Y142314 * HPLC法含量测定 2-8℃，避光 20mg/4℃ 140730-20060
Y142315 赖脯胰岛素 HPLC法含量测定 4℃，避光 25mg 140729-200501
Y142316 * HPLC法含量测定 -20℃，避光 50mg 140728-200803
Y142317 γ-* 鉴别 常温，避光 20mg 140723－200501
Y142318 角鲨烯 含量测定 2-8℃，避光 0.5ml 140721-200601
Y142319 一磷酸腺苷钠 含量测定 常温，避光 20mg 140719-200501
Y142320 脱氧核糖*核苷酸钠 含量测定 2-8℃，避光 20mg 140718-200501
Y142321 脱氧核糖胸腺嘧啶核苷酸钠 含量测定 -20℃，避光 20mg 140717-200501
Y142322 脱氧核糖腺嘌呤核苷酸钠 含量测定 -20℃，避光 20mg 140716-200501
Y142323 脱氧核糖胞嘧啶核苷酸钠 含量测定 -20℃，避光 20mg 140715-200501
Y142324 抗眼镜蛇毒原血浆（马源） 检查 -20℃，避光 20mg 140713-200501
Y142325 * HPLC法含量测定 2-8℃，避光 256μg/支 140711-200702
Y142326 * UV法含量测定 常温，避光 20mg 140710-200401
Y142327 * 含量测定 常温，避光 50mg 140709-201003
Y142328 胸腺嘧啶 有关物质检查 常温，避光 100mg 140708-200401
Y142329 * 含量测定 常温，避光 200mg 140706-200702
Y142330 L-* HPLC法含量测定 常温，避光 600mg/支 140705-200602
Y142331 琥珀酰明胶 含量测定 常温，避光 700mg 140704-200401
Y142332 去羟* 含量测定 常温，避光 100mg 140703-200401
Y142333 N-（2）-L-丙氨酰-L-* 含量测定 常温，避光 100mg 140702-200501
Y142334 * 鉴别 -20℃，避光 25mg 140700-200401
Y142335 盐酸半* 供鉴别与 常温，避光 100mg 140699-201001
Y142336 * 供鉴别用 2-8℃，避光 2ml 140697-200602
Y142337 L-盐酸* 含量测定 常温，避光 100mg 140693-200401
Y142338 * 鉴别 常温，避光 200mg 140692-200301
Y142339 L-* 含量测定 常温，避光 100mg 140691-200401
Y142340 L-* 含量测定 常温，避光 100mg 140689-200401
Y142341 L-* 含量测定 常温，避光 100mg 140688-200401
Y142342 L-* 含量测定 常温，避光 100mg 140687-200401
Y142343 L-* 含量测定 常温，避光 100mg 140686-200401
Y142344 L-异* 含量测定 常温，避光 100mg 140683-200401
Y142345 L-* 含量测定 常温，避光 100mg 140682-200401
Y142346 L-* 含量测定 常温，避光 100mg 140681-200401
Y142347 L-* 含量测定 常温，避光 100mg 140680-201002
Y142348 L-* 含量测定 常温，避光 50mg 140677-200405
Y142349 胞磷*钠 HPLC法含量测定 常温，避光 50mg 140675-200803
Y142350 * 鉴别 常温，避光 10mg 140674-200401
Y142351 * 供鉴别及含量测定用 常温，避光 100mg 140673-201006
Y142352 N-乙酰-L-* 含量测定 常温，避光 100mg 140672-200501
Y142353 乙酰半* 含量测定 常温，避光 100mg 140671-200501
Y142354 * HPLC法含量测定 常温，避光 50mg 140669-200903
Y142355 D-核糖 含量测定 常温，避光 10mg 140668-200301
Y142356 * HPLC法含量测定 4℃，避光 20mg 140667-200601
商铺：https://www.hbzhan.com/st32881/
主营产品：ELISA试剂盒，人ELISA试剂盒，小鼠ELISA试剂盒，豚鼠ELISA试剂盒，兔ELISA试剂盒，羊ELISA试剂盒，牛ELISA试剂盒，鸡ELISA试剂盒，鸭ELISA试剂盒，植物ELISA试剂盒
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