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现货人抵抗素ELISA检测试剂盒销售

阅读:411发布时间:2013-12-31

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    上海酶联生物研究所

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本试剂仅供研究使用  标本:血清或血浆

 

试验原理:

Resistin试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验(ELISA).ELISA检测试剂盒已知Resistin浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将Resistin和*标记的抗体同时温育。洗涤后,加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤,去除未结合的酶结合物,然后加入底物A、B,和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中Resistin的浓度呈比例关系。

自备材料

1. 蒸馏水。

2. 加样器:5ul、10ul、50ul、100ul、200、500ul、1000ul。

3. 振荡器及磁力搅拌器等。

 

安全性

1. 避免直接接触终止液和底物A、B。ELISA检测试剂盒一旦接触到这些液体,请尽快用水冲洗。

2. 实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。

3. 不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。

 

操作注意事项

1. 试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。

2. 实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。

3. 不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。

4. 使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器。

5. 使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。

6. 洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。

7. 底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。

8. 加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。

9. 按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。

 

样品收集、处理及保存方法

1、 血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后,1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。

2、 血浆-----EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。

3、 细胞上清液---1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。

4、 保存------如果样品不立即使用,应将其分成小部分-70 ℃保存,避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒,检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。

 

试剂的准备

标准品:标准品的系列稀释应在实验时准备,不能储存。稀释前将标准品振荡混匀。

1. 洗涤缓冲液(50×)的稀释:蒸馏水50倍稀释。

 

操作步骤

1. 使用前,将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫,以免加样时加入大量的气泡,产生加样上的误差。

2. 根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定,能使用复孔的尽量做复孔。

3. 加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的*标记的抗体。盖上膜板,轻轻振荡混匀,37℃温育1小时。

4. 甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。

5. 每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP,轻轻振荡混匀,37℃温育30分钟。

6. 甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。

7. 每孔加入底物A、B各50ul,轻轻振荡混匀,37℃温育10分钟。避免光照。

8. 取出酶标板,迅速加入50ul终止液,加入终止液后应立即测定结果。

9. 在450nm波长处测定各孔的OD值。


局限

6号标准品以上的结果为非线性的,根据此标准曲线无法得到的结果。

 

试剂盒性能

1. 灵敏度:zui小的检测浓度小于1号标准品。稀释度的线性。样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990。

2. 特异性:不与其它细胞因子反应。

3. 重复性:板内、板间变异系数均小于10%。

 

结 果 判 断 与 分 析

1、仪器值:于波长450nm的酶标仪上读取各孔的OD值

 

2、以吸光度OD值为纵坐标(Y),相应的Resistin标准品浓度为横坐标(X),做得相应的曲线,样品的Resistin含量可根据其OD值由标准曲线换算出相应的浓度。

 

3、检测值范围:0-240pg/ml

 

4、敏感度: 0.1 pg/ml

蛋白S(PROS)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Protein S (PROS) 48T/96T Y11150 Homo sapiens (Human)
色素上皮衍生因子(PEDF)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Pigment Epithelium Derived Factor (PEDF) 48T/96T Y11151 Homo sapiens (Human)
表面活性物质关联蛋白B(SPB)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Surfactant Associated Protein B (SPB) 48T/96T Y11152 Bos taurus; Bovine (Cattle)
表面活性物质关联蛋白C(SPC)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Surfactant Associated Protein C (SPC) 48T/96T Y11153 Bos taurus; Bovine (Cattle)
瘦素(LEP)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Leptin (LEP) 48T/96T Y11154 Chicken (Gallus)
基质金属蛋白酶28(MMP28)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Matrix Metalloproteinase 28 (MMP28) 48T/96T Y11155 Homo sapiens (Human)
肌腱蛋白C(TNC)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Tenascin C (TNC) 48T/96T Y11156 Homo sapiens (Human)
肌腱蛋白C(TNC)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Tenascin C (TNC) 48T/96T Y11157 Rattus norvegicus (Rat)
*ⅩⅢB肽(F13B)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Coagulation Factor XIII B Polypeptide (F13B) 48T/96T Y11158 Homo sapiens (Human)
膜联蛋白A2(ANXA2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Annexin A2 (ANXA2) 48T/96T Y11159 Mus musculus (Mouse)
膜联蛋白A2(ANXA2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Annexin A2 (ANXA2) 48T/96T Y11160 Rattus norvegicus (Rat)
羧甲基赖氨酸(CML)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Carboxymethyl Lysine (CML) 48T/96T Y11161 General
铁调素(Hepc)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Hepcidin (Hepc) 48T/96T Y11162 Homo sapiens (Human)
白介素33(IL33)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Interleukin 33 (IL33) 48T/96T Y11163 Homo sapiens (Human)
内皮素受体A(ETRA)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Endothelin Receptor A (ETRA) 48T/96T ELISA检测试剂盒Y11164 Rattus norvegicus (Rat)
内皮素受体B(ETRB)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Endothelin Receptor B (ETRB) 48T/96T Y11165 Rattus norvegicus (Rat)
微管关联蛋白τ(MAPτ)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Microtubule Associated Protein Tau (MAPt) 48T/96T Y11166 Homo sapiens (Human)
τ-蛋白激酶1(τPK1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Tau-Protein Kinase 1 (tPK1) 48T/96T Y11167 Homo sapiens (Human)
强啡肽(Dyn)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Big Dynorphin (Dyn) 48T/96T Y11168 Rattus norvegicus (Rat)
甘露糖结合蛋白(MBL)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Mannose Binding Lectin (MBL) 48T/96T Y11169 Mus musculus (Mouse)
甘露聚糖结合凝集素关联*蛋白酶1(MASP1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Mannose Associated Serine Protease 1 (MASP1) 48T/96T Y11170 Mus musculus (Mouse)


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