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胰岛素放免试剂盒操作说明书

阅读:1511发布时间:2010-04-20

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胰岛素放免试剂盒操作说明书
                                                                                                 INSHY-055 RIA  KIT
 
胰岛素(Insulin INS)是胰岛B细胞合成和分泌的一种多肽激素,分子量约 6000,它由α、
β两条肽链组成。它的主要功能增加细胞膜对葡萄糖、氨基酸及钾离子的通透性,促进这些物质
进入细胞内;促进糖原合成酶由非活化型转化为活化型,促进糖的利用,抑制脂肪分解,促进脂类
合成;促进RNA、DNA及蛋白质的合成,进而促进细胞的构成、能量的贮备和细胞功能调节等。测
定人血清或血浆胰岛素含量主要用于对糖尿病的研究,确定糖尿病的类型,胰岛素β细胞的分泌功能,胰岛素瘤的诊断,对探讨冠心病机理,研究某些药物对糖代谢影响及各种内分泌紊乱疾病等都有一定的意义和价值。
 
     样品采集:用*静脉采血,待血液凝固后分离血清。血清-20℃冰冻保存,可使用
                两个月。溶血样品,枸椽酸抗凝样品不能应用。
 
 药盒组成
  1、125I- INS 1 瓶。
  2、INS抗体1瓶。
  3、INS标准品7瓶,浓度为5、10、20、40、80、160 цIU/ml。
  4、缓冲液 1瓶       
  5、免疫分离剂(第二抗体) 1瓶。
  6、质控血清2瓶。    
 
  操作方法:
                         INS  RIA  KIT操作程序(单位:ul)
         ————————————————————————————
               试   剂      T      NSB      S0       S1~S6     样 品
             ————————————————————————————
               零 标 准    ——    200      100       ——      ——             
               标 准 品    ——    ——    ——       100       ——
               标      品    ——    ——     ——       ——       100
               抗      体    ——    ——     100       100       100
            ————————————————————————————   
                         充分混匀,37℃ 温育0.5小时
            ————————————————————————————   
 
                      125I- 胰岛素    100   100       100       100       100
              ————————————————————————————   
                         充分混匀,37℃ 温育2小时
              ————————————————————————————             
               分 离 剂    ——   1000     1000       1000     1000
              ————————————————————————————
         混匀,室温15分钟,3500 转/分 离心15分钟,去上清,测定沉淀cpm-值。
 
  结果计算:
     以N/T、B/T计算NSB、S0结合百分率,以B/B0计算标准及待测物结合百分率,
  在半对数座标纸上绘制标准曲线,查出样品值或由自动Υ-计数仪器直接读出结果。
  注意事项:
       1、本月标准品每瓶用         ml缓冲液稀释;
          本月药盒抗体每瓶用       ml缓冲液稀释;
          本月药盒标记每瓶用       ml缓冲液稀释;
       2、收到测定盒后,请放2-8℃冰箱中保存。
          * 3、分离剂在使用前充分混匀(不可冰冻),标记、抗体、溶解后,直接应用,冰冻
保存。标准品溶解后,0.1ml分装,-20℃可放一月,避免反复冻融。
  本试剂盒主要技术参数:
      标准范围:5-160u IU/ml
      灵敏度: 2 u IU/ml 。
      精密度:批内:CV<10%;批间CV为<15% 。
  正常参考值
各实验室应建立自己的正常值,下列正常参考值仅供参考:          单位:μ IU/mL.

 
 
 
 
30分钟
 
60分钟
 
120分钟
 
180分钟
 
正常(N=216)
(100克馒头餐)
 
 
14.0±8.70
 
 
 
75.8±43.8
 
58.2±38.1
 
22.4±20.6
 
正常(N=87)
(75克葡萄糖)
 
 
12.7±7.10
 
76.7±44.4
 
76.6±33.8
 
46.9±26.7
 
14.9±9.90
 
II型糖尿病例(N=63)
(100克馒头餐)
 
 
18.8±7.40
 
 
 
48.4±29.3
 
50.4±27.4
 
32.5±14.50

   本月药盒参考数据:  
        ———————————————————————————————————————
                T     NSB     S0           S1      S2      S3      S4      S5      S6
        ———————————————————————————————————————
        CPM
        ———————————————————————————————————————
                N/T%       B0/T%       B/ B0 %
        ———————————————————————————————————————   

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