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上海酶联生物研究所
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阅读：1061发布时间：2010-06-07
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血液核酸筛查系统介绍
献血是我国医用血液的zui主要来源，根据全国血液中心1999年的统计，我国各主要血站采集的血液样本达到680万份，为2百万病人提供血液进行输血治疗。一直以来， 我国血站的血液病毒筛查都是使用免疫学方法， 大部分血站是用国产ELISA试剂做两遍测试，检查项目包括：乙肝表面抗原（HBSAg）,丙肝抗体（HCVAb）和爱滋病毒抗体（HIVAb）。该方法操作程序复杂，灵敏度较低（检出下限约为106拷贝），重复性较差，同时存在抗原抗体的变异，再加上病毒感染的窗口期，使得酶联免疫方法存在一定程度的漏检，每年7百万份血液筛查的漏检构成输血安全的极大威胁，近年来，因输血导致输血后肝炎的诉讼也不断增加，血液安全再次受到全会的关注。
为保障输血安全，世界各国不断改进血液筛查技术，核酸检测技术（NAT）由于灵敏度高，准确性强，重复性好，而且是直接检测病毒本身，受到各国血液筛查工作者的重视。随着核酸检测技术的发展和成熟，尤其是荧光基因探针PCR方法的应用 ，NAT逐渐进入血液筛查领域，近年美国红十字会开始将NAT应用于血液筛查，明显提高了HBV、HCV和HIV的检测率。欧洲和日本也普遍采用NAT作为血液的复筛手段。
荧光基因探针PCR方法是一种用体外扩增技术（PCR）来检测病毒核酸的方法，由于采用了的荧光信号探针技术（通过标记有荧光基团的探针来显示PCR扩增产物增加的动态过程）和实时基因探针检测技术（用自动化仪器连续检测和分析PCR反应过程中的动力学过程，实现准确基因探针计算），具有很高的灵敏度（可检出1个拷贝的目的基因）和准确性，是当前世界上的分子基因探针检测技术。
我国是肝炎病毒的高流行区，1995年全国肝炎流行病学调查研究结果显示，约9.75％的人群为HBsAg携带者，3.2％的人群抗-HCV阳性，HIV的感染率迅速上升。zui近的调查数据显示，人群中乙肝携带者已上升到10~12％，丙肝携带者也有近5％。而我国的ELISA产品质量一直存在不稳定的问题（根据卫生部临检中心的2000年室间质控报告），加上ELISA固有的方法学上的缺陷，在这样一个高流行人群中，征集筛查健康安全的医疗用血是血液事业的重要工作，核酸检测技术及其标准急待于在我国被确立和推广应用。
然而，我国的血液筛查还存在一个经济成本问题。目前每份血样的病毒筛查费用是10-15元/遍，而如果要采用NAT，费用将上升到200-300元，这将极大的限制NAT的实际应用。解决这一问题的方法，就是大幅度提高NAT试剂的灵敏度，以实现对10至12份血样的混合检测（pooling），这样，平均每份血样的病毒筛查费用将下降到是30元以下，为实际推广应用铺平道路。
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