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技术文章

细胞活力鉴定——台盼蓝染色法

阅读:2720发布时间:2010-7-31

原理:
细胞损伤或死亡时,台盼蓝可穿透变性的细胞膜,与解体的DNA 结合,使其着色。而活细胞能阻止染料进入细胞内。故可以鉴别死细胞与活细胞。

用品:
1. 4%
台盼蓝母液:称取4g台盼蓝,加少量蒸馏水研磨,加双蒸水至100ml,用滤纸过滤,4度保存。使用时。用PBS稀释至0.4%
2.
吸管、*、显微镜

步骤:
1
、制备单细胞悬液。并作适当稀释(106 细胞/ml
2
、染色:细胞悬液与0.4%台盼蓝溶液以9:1混合混匀。
3
、计数:在三分钟内,用计数板分别计数活细胞和死细胞

结果统计:
镜下观察,死细胞被染成淡蓝色,而活细胞拒染。
根据下式求细胞活力:
活细胞率(%= 活细胞总数/(活细胞总数+死细胞总数)×100

注意事项:台盼蓝染细胞时,时间不宜过长。否则,部分活细胞也会着色,会干扰计数。

 

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