【爬片的准备】
1.爬片可用一般的盖玻片，也可用爬片；
2.应用盖玻片，可根据自己的需要剪裁成合适的大小，以备置于6孔板、12孔板或24孔板；裁剪时可用前护士输液用于打开玻璃安瓶的小沙轮，或者是口腔科的那种小沙轮，轻轻划一下后，稍用力一掰就分开了。
如果接种大皿的话，我一般不将盖玻片切开，直接清洁后放入培养皿中，到染色时再将之切开，这样既保证了细胞均一性，又可同时做几个指标的染色。
3.将剪裁好的爬片，置于浓硫酸中浸泡并过夜，第二天先用自来水冲洗20遍，再置于无水酒清中浸泡6小时，再用三蒸水冲洗3遍（个人认为主要目的是将酸冲洗干净就可以了，如果不干净的话，细胞帖壁不好），放在饭盒或者玻璃培养皿中烘干后进行高压消毒。
4.高压后取出放入烤箱中烤干，备用。烤干后可放入超净台中。
5.关于多聚赖氨酸，很多人都将玻片用此处理，以使细胞与玻片结合更牢。但我在做爬片时从来没用过多聚赖氨酸，细胞贴壁仍然很好，且在做后续的免疫细胞化学染色、TUNEL等凋亡检测、免疫荧光等也从未脱过片。
【细胞爬片】
1.*消化细胞后计数重悬细胞于*培养基中。
2.加细胞时，根据玻片的大小，先在每个孔里准备放爬片的位置滴少量培养基，目的是使玻片与培养皿靠培养基的张力粘合到一起，然后放玻片，防止加细胞悬液时玻片漂起，造成双层细胞贴片。整个过程注意无菌操作。
3.根据自己的需要选择合适的细胞密度种入培养板内即可
4.待细胞贴壁后，可去上清加含药培养基。
5.按照实验设计，作用一定时间后取玻片。取玻片时由于玻片与培养皿底结合较紧，张力较大，我一般将注射器针头针尖向背面弄个小钩，这样将爬片轻轻勾起，用小镊子取出就可以了。如果要做诸如24h，48h，72h等这样时间点的实验的话，将所需数量的爬片取出时应用酒精灯火焰烧一下针头和镊子。末取出的可接着继续培养。
【细胞爬片的固定】
细胞爬片取出后，一般用PBS洗2遍，然后再做固定。当然，根据研究目的，PBS洗也不是一定要做的，比如做凋亡的TUNEL染色时就避免洗，因为凋亡的细胞在洗的过程中有可能会脱落。
另外在保存细胞爬片的时候，我一般用培养皿或板，先在皿底放一层面巾纸，然后再放爬片，这样方便做实验时取片。然后盖上盖子，并在盖子上做标记，为避免混淆，可用透明胶带将盖子和皿连在一起。一般-20℃保存2-3个月的片子做免疫组化是没有问题的。
以下为常用的固定液
1. 冷丙酮 可用于一般的免疫组化染色。
将纯的丙酮预先放入冰箱-20℃后便为冷丙酮（放心，丙酮在此温度不会为固体的）细胞爬片取出后，PBS洗2遍，便可加入冷丙酮于-20℃（丙酮有很强的挥发性，注意将含有丙酮和爬片的器皿盖严，防止其挥发）固定10分钟。取出后，室温吹干，然后放入-20℃保存。
2. 多聚甲醛(常用4%)：可用于免疫电镜；也可用于免疫荧光以及TUNEL染色。
主要检测组织内一些性能娇弱的抗原特别是细胞表面抗原，例如各类淋巴细胸分化决定簇(CD)、主要组织相容性抗原等
室温固定15分钟后，将表面液体吹干，入-20℃保存
3. 95％乙醇，可用于免疫组化。
优点：穿透性强、抗原性保存较好。
缺点：但醇类对低分子蛋白质、多肽及胞浆内蛋白质保存效果较差，使蛋白变性的作用轻，固定后可再溶解；染色过程中，温育时间长，抗原可流失而减弱反应强度
室温固定15分钟后，将表面液体吹干，入-20℃保存
4. 甲醛(福尔马林)应用zui广
优点：形态结构保存好，且穿透性强，
缺点： 甲醛放置过久可氧化为甲酸，使溶液pH降低，影响染色； 分子间交联形成的网格结构可能部分或*掩盖某些抗原决定簇，使之不能充分暴露。可造成假阴性的染色结果。
产品：
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| CAS:1404-93-9,盐酸*现货供应 | 盐酸* | 1404-93-9 |
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| CAS:5571-36-8,缩酮物现货供应 | 缩酮物 | 5571-36-8 |
| CAS:1037-50-9,*钠现货供应 | *钠 | 1037-50-9 |
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| CAS:106560-14-9,* 磺胺类现货供应 | * 磺胺类 | 106560-14-9 |
| CAS:32543-38-7,混旋肉碱乳清酸盐现货供应 | 混旋肉碱乳清酸盐 | 32543-38-7 |
| CAS:6381-77-7,异vc钠（异抗坏血酸钠）类现货供应 | 异vc钠（异抗坏血酸钠）类 | 6381-77-7 |
| CAS:33564-30-6,*现货供应 | * | 33564-30-6 |
| CAS:6153-64-6,*现货供应 | * | 6153-64-6 |
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| CAS:566-48-3,福美斯坦现货供应 | 福美斯坦 | 566-48-3 |
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| CAS:32986-56-4,*现货供应 | * | 32986-56-4 |
| CAS:114977-28-5,*现货供应 | * | 114977-28-5 |
| CAS:26787-78-0,*现货供应 | * | 26787-78-0 |
| CAS:532-03-6,*现货供应 | * | 532-03-6 |
| CAS:50-24-8,*龙现货供应 | *龙 | 50-24-8 |
| CAS:43210-67-9,芬苯达唑现货供应 | 芬苯达唑 | 43210-67-9 |
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| CAS:16837-52-8,*现货供应 | * | 16837-52-8 |
| CAS:83-43-2,* 现货供应 | * | 83-43-2 |
| CAS:503612-47-3,阿哌沙班现货供应 | 阿哌沙班 | 503612-47-3 |
| CAS:51481-61-9,*现货供应 | * | 51481-61-9 |
| CAS:81-13-0,D-泛醇 现货供应 | D-泛醇 | 81-13-0 |
| CAS:124665-09-0,心血管原料药K5现货供应 | 心血管原料药K5 | 124665-09-0 |
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| CAS:75330-75-5,洛伐司他汀现货供应 | 洛伐司他汀 | 75330-75-5 |
| CAS:138112-76-2,* 现货供应 | * | 138112-76-2 |
