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阅读:72发布时间:2015-11-27
一、匀浆介质的制备:
一般采用pH 7.4, 0.01mol/L Tris-HCl, 1mmol/L EDTA-2Na, 0.01mol/L蔗糖,0.8%氯化钠溶液或直接用0.86%的生理盐水作为匀浆介质。
二、组织匀浆的制备
1、取组织块(0.1g~0.2g)zui少可到2~5mg在冰冷的生理盐水中漂洗,除去血液,滤纸拭干,准确称重,放入5ml的匀浆管中。
2、按重量(g):体积(ml)=1:9的比例加入9倍体积的匀浆介质(pH7.4, 0.01mol/L Tris-HCl,1mmol/L EDTA-2Na ,0.01mol/L蔗糖,0.8%的氯化钠溶液)或者0.86%的生理盐水于匀浆管中,冰水浴条件下,用眼科小剪尽快剪碎组织块。
3、匀浆的方式有多种:手工匀浆,机器匀浆,超声粉碎。
① 手工匀浆:左手持匀浆管将下端插入盛有冰水混合物的器皿中,右手将捣杆垂直插入套管中,上下转动研磨数十次(6~8分钟),充分研碎,制成10%的匀浆液。
② 机器匀浆:用组织捣碎机10000~15000 转/分 上下研磨制成10%组织匀浆,也可用内切式组织匀浆机制备(匀浆时间10秒/次,间隙30秒,连续3~5次,在冰水中进行),皮肤、肌肉组织等可延长匀浆时间。
③ 超声粉碎:用超声粉碎机进行粉碎,可用Soniprep150型超声波发生器以振幅14微米超声处理30秒使细胞破碎,也可用国产超声波发生仪,用400安培,5秒/次,间隙10秒反复3~5次。
镜检观察:取少量组织匀浆作涂片(直接涂片、染色均可以),显微镜下观察细胞是否破碎,若没有则可延长匀浆时间。
4、将制备好的10%匀浆液用普通离心机或低温低速离心机2500转/分左右,离心10~15分钟,取上清液进行测定.
三、样本保存:
动物组织样本暂时不测定,可立即低温冻存,温度越低越好,中间如*冻融,-20℃以下可保存三个月,-70℃以下可保存六个月。
制备好的匀浆液建议不要冻存,当天进行测定,如放置时间过长相关酶活会有所下降,部分指标4℃可存放3~5天(如SOD要存放2~3天,MDA可存放3~5,总蛋白测定可存5~7天等)
产品:
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马兜铃内酰胺 A标准品,cas:127191-86-0对照品 |
小秦艽对照品/标准品 |
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CAS:52888-80-9,苄草丹标准品/对照品价格 |
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盐酸贝那替嗪对照品/标准品 |
标准品|对照品 |
CAS:3804-70-4,二氢欧山芹素标准品/对照品 |
CAS:5853-29-2,盐酸吐根酚碱标准品/对照品 |
CAS:93-14-1,愈创甘油醚标准品/对照品 |
*二硫化物对照品/标准品 |
龙胆(龙胆)对照品/标准品 |
土槿皮丙酸标准品,cas:82601-41-0对照品 |
过氧苯甲酰对照品/标准品 |
别隐品碱标准品,cas:485-91-6对照品 |
松叶标准品/对照品 |
CAS:26833-85-2,三尖杉酯碱标准品/对照品 |
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托曲珠利标准品|对照品,cas:69004-03-1 |
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徐长卿标准品/对照品 |
苯磺隆标准品|对照品,cas:101200-48-0 |
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胡芦巴碱对照品/标准品 |
藤黄标准品/对照品 |
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铪标准溶液,cas:7440-58-6 |
N-甲基*对照品/标准品 |
中碱标准品|对照品,cas:2752-64-9 |
CAS:2971-90-6,氯羟吡啶标准品/对照品价格 |
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CAS:525-57-5,去甲骆驼蓬碱标准品/对照品 |
CAS:13463-28-0,圣草次苷标准品/对照品 |
氯化苯基汞标准品|对照品,cas:100-56-1 |
美他环素对照品/标准品 |
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龙眼肉对照品/标准品 |
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氟苯脲标准品|对照品,cas:83121-18-0 |
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CAS:20243-59-8,羟基芫花素标准品/对照品 |
红芪标准品/对照品 |
CAS:78281-02-4,羟基*A标准品/对照品 |
*标准品/对照品 |
CAS:88497-88-5,木脂素标准品/对照品 |
CAS:478-01-3,川陈皮素标准品/对照品 |
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绵萆薢标准品/对照品 |
丹参酮I对照品/标准品 |
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