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022240克氏双糖铁培养基(KliglerIronAgar)用途:克氏双糖铁琼脂用于鉴别肠道菌发酵葡萄糖和乳糖,及产生硫化氢的生化反应(GB/T4789.28-2003中4.29,GB/T4789.6-2003)
022240 克氏双糖铁培养基
(Kligler Iron Agar)
用 途:
克氏双糖铁琼脂用于鉴别肠道菌发酵葡萄糖和乳糖,及产生硫化氢的生化反应(GB/T4789.28-2003 中4.29,GB/T4789.6-2003)。
原 理:
蛋白胨、牛肉膏粉和酵母膏粉提供氮源、维生素、矿物质;乳糖、葡萄糖为可发酵糖类,其产酸时通过酚红指示剂测出,酸性呈黄色,碱性呈红色;可被某些细菌还原为硫化氢,与铁盐生成黑色硫化铁;氯化钠维持均衡的渗透压;琼脂是培养基的凝固剂。各种革兰氏阳性杆菌也可生长及产生硫化氢。
培养基配方(每升):
蛋白胨 20g
牛肉膏粉 3g
酵母膏粉 3g
乳糖 10g
葡萄糖 1g
氯化钠 5g
柠檬酸铁铵 0.5g
0.5g
琼脂 12g
酚红 0.025g
最终pH 7.4±0.2
使用方法:
1、称取克氏双糖铁琼脂55g,加入蒸馏水或去离子水1 L,搅拌加热煮沸至*溶解,分装试管(装量宜多些),121℃高压灭菌15min,制成高层斜面,待冷却后,备用。
2、挑取待检菌的新鲜培养物,穿刺接种混合克氏双糖铁琼脂斜面。接种时先在斜面划线,然后再穿刺底层,反之亦可。(应注意不要在分离平板上菌落密集的部位挑取可疑菌落,而应在菌落稀疏部位挑取单个菌落。)
3、将试管放入培养箱内36±1℃培养18—24h。
4、观察结果。观察斜面与底层的反应情况。
质量控制:
配成的培养基为红色,下列菌株接种后于36±1℃培养24h结果如下:
注:“A"为产酸,“K"为产碱。
贮 存:贮存于避光、阴凉干燥处,用后立即旋紧瓶盖。贮存期三年。
规 格:250g
参考文献:
1.GB/T4789.6-2003 中华人民共和国国家标准食品卫生微生物检验 致泻大肠埃希氏菌检验
2.GB/T4789.28-2003中华人民共和国国家标准 食品卫生微生物检验 染色法,培养基和试剂
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