基底膜/基质胶Matrigel技术说明书      Matrigel基底膜/基质胶

Catalog Number : 40111ES08 

Quantity size :   5  ml   

保存温度: -20 °C保存，有效期6个月。

产品介绍：

　 Matrigel是从富含胞外基质蛋白的EHS小鼠肿瘤中提取出基底膜基质，其主要成分有层粘连蛋白、Ⅳ型胶原、巢蛋白、硫酸肝素糖蛋白，还包含生长因子和基质金属蛋白酶等。在室温条件下，Matrigel聚合形成具有生物学活性的三维基质，模拟体内细胞基底膜的结构、组成、物理特性和功能，有利于体外细胞的培养和分化，可用于对细胞形态、生化功能、迁移、侵染和基因表达等的研究。

Matrigel基底膜/基质胶形成的三维培养基质，可促进上皮细胞、肝细胞、Sertoli细胞、黑色素瘤细胞、血管内皮细胞、甲状腺细胞及毛囊细胞等的贴壁与分化。同时，Matrigel还能影响乳腺上皮细胞的蛋白表达，支持外周神经的新生和牛输卵管上皮细胞的分化。

本Matrigel基底膜/基质胶为无菌制品，浓度为9-20mg/ml，满足多种实验要求，包括：血管生成研究，肿瘤细胞迁移和细胞侵袭，体内肿瘤模型建立等。

产品特性基底膜/基质胶Matrigel技术说明书

冻融后，轻轻摇晃试剂瓶使 Matrigel 分散均匀。所有操作均需在无菌环境下进行，试剂瓶瓶盖可用 70％乙醇擦拭，并自然干燥。应使用预冷的移液器以保证 Matrigel 呈匀浆状。

细胞可在 0.5mm 厚度的 Matrigel 基质层表面生长，也可在 1mm 厚度的 Matrigel 三维基质内生长。过度稀释的 Matrigel 会形成非胶质的蛋白层，可以用于细胞贴壁，但不能用于细胞的分化研究。

产品使用：可将冻融后的 Matrigel 分装在多个小管，所有分装均需用预冷的冻存管，迅速冷冻并保存，避免多次冻融。

Matrigel 在 22-35℃温度环境下快速成胶，因此溶解时在 4℃冰上 冻融（4 度时会随着

温度的上升部分成胶）。所有用品在使用前需置于冰浴，必须使用预冷的移液管、吸头及小管操作 Matrigel。成胶后的 Matrigel 可以在 4℃24－48 小时后重新呈液态。

推荐包被与成胶方法

注意：为了保证 Matrigel 基质膜的成胶性能与稳定性，稀释浓度不应低于 1：3，可用无血清培养基稀释，Matrigel 成胶后立即使用。

1.薄胶成胶方法：

1） 冻融后，用预冷的移液枪头混匀 Matrigel 基质成匀浆状。

2） 将需要使用基底膜/基质胶Matrigel热销的培养板置于冰上，按 50μL/cm² 生长面积的浓度加入Matrigel 基质。

3） 在 37℃放置 30 分钟，此时平板即可使用。

2.厚胶成胶方法：基底膜/基质胶Matrigel技术说明书

1） 冻融后，用预冷的移液枪头混匀 Matrigel 基质成匀浆状。

2） 将需要使用的培养板置于冰浴，将培养的细胞与 Matrigel 基质混合，用预冷的移液枪头使其悬浮均匀于基质中。按照150－200μL/cm² 生长面积的浓度加入 Matrigel 基质。

3） 在 37℃放置 30 分钟，可成胶。可以加入细胞培养的基质，也可使细胞直接生长在胶表面。

3.薄层包被方法：

1） 冻融后，用预冷的移液枪头混匀 Matrigel 基质成匀浆状。

2） 采用无血清培养基稀释 Matrigel 基质到需要的浓度。建议根据具体的实验做个梯度实验，从而确定 包被浓度。

3） 将稀释的 Matrigel 基质加入需要包被的培养器皿中，包被量至少覆盖整个器皿的生长表面。室温下孵育1小时。

4） 去除未结合的 Matrigel，用无血清培养基轻轻地冲洗。此时平板即可使用。

 （注：Matrigel基质胶包被的平板当天使用，但也可根据具体应用调整。包被好的平板加入培养基后，在37℃zui多可存放一周）

注意事项：

1）Matrigel基底膜/基质胶的充分融化至少需要4℃ ，某些情况下，产品浓度很高，则需要更久的时间来融胶。

2）整个操作过程中，移液器、枪头以及试管都必须提前预冷，因为Matrigel基底膜/基质胶在超过10℃的情况下就会开始成胶。

3）对于小管形成实验，Matrigel基底膜/基质胶的浓度不少于10mg/ml。

4）Matrigel基底膜/基质胶的使用浓度不要低于3mg/ml。体内实验为了防止不充分成胶，Matrigel基底膜/基质胶的浓度不要基底膜/基质胶Matrigel热销低于4mg/ml。

5)为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。