质粒小提试剂盒常见问题及解答
没有提出质粒或者质粒浓度很低
a、菌种老化：
建议：对于甘油保存的菌种，需要*行活化。涂布或者划线菌种，重新挑选单菌落进行液体培养，并对菌种进行初摇活化，按照1：500的比例进行菌种培养。二次培养细胞不要超过16小时。
b、质粒丢失
建议：某些质粒在多次继代培养的过程中会出现丢失的现象，另外检查筛选抗生素的浓度是否正确。
c、裂解不充分
建议：如果采用超过推荐量的菌体进行质粒制备，会导致菌体裂解不充分。可适当减少菌体的用量或者相应增大各种Buffer的用量。请根据选取的试剂盒，处理相应量的细菌量。
d、Buffer中有沉淀未溶解
建议：Buffer B和Buffer C在温度较低时会出现沉淀，使用前请检查是否有沉淀生成，如有沉淀生成，请置于37℃温育片刻，待溶液澄清后使用。
e、DNA Wash Buffer中未按要求加入乙醇
建议：按照说明书要求加入要求量的无水乙醇，使用后旋紧瓶盖，防止乙醇挥发。
f、溶解液pH值不正确
建议：将DNA从柱子上溶解下来的zui适pH值在7.0~8.5之间，如果溶解液的pH超出此范围将会显著影响溶解效果，请使用试剂盒配套的Elution Buffer（pH 8.5，10 mM Tris-HCl）进行溶解，如果用ddH2O或者其他溶液进行溶解，请确保pH在7.0~8.5之间。
g、溶解体积及时间的选择
建议：溶解体积将会影响zui终的收获量，溶解体积越大，收获量越高，但是浓度将会降低。请使用试剂盒推荐的溶解体积进行溶解，以保证的收获量和浓度。如果需要高浓度的质粒，请减少溶解体积。另外，如果想收获高浓度高收获量的质粒，可进行二次溶解。
建议：加入Elution Buffer后，室温放置2~5 min，更有利于溶解。
质粒纯度不高
a、蛋白质污染OD260/ OD280<1.8
建议：选择推荐量的菌体，离心后小心吸取上清，如果上清液中混有悬浮物，可再次离心，以*去除蛋白质。
b、RNA污染OD260/ OD280>2.0
建议：检查配送的RNase A是否*加入到Buffer A中，加入RNase后，Buffer A/RNase应该存放在4℃，如果存放时间过长，或者没有正确存放，请重新加入RNase。
c、基因组DNA污染
建议：加入Buffer B后，轻轻颠倒混匀，避免剧烈震荡涡旋，加入Buffer B的处理时间不要超过5 min。
注：内容供参考，具体产品信息请来电或在线咨询。
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