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大鼠D二聚体(D2D)ELISA试剂盒,大鼠elisa试剂盒详细分解

时间:2012/8/22阅读:258
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      大鼠D二聚体(D2D)ELISA试剂盒,大鼠elisa试剂盒详细分解

原理,大鼠elisa试剂盒原理

        本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠D二聚体水平。用纯化的其抗体包被微孔板,制成固相抗体。往包被单抗的微孔中依次加入大鼠D二聚体,再与HRP标记的其抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过*洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成zui终的黄色。颜色的深浅和样品呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中大鼠D二聚体的浓度。

组成,大鼠elisa试剂盒组成

1 30倍浓缩洗涤液 20ml×1瓶 7 终止液 6ml×1瓶
2 酶标试剂 6ml×1瓶 8 标准品(160pg/ml) 0.5ml×1瓶
3 酶标包被板 12孔×8条 9 标准品稀释液 1.5ml×1瓶
4 样品稀释液 6ml×1瓶 10 说明书 1份
5 显色剂A液 6ml×1瓶 11 封板膜 2张
6 显色剂B液 6ml×1/瓶 12 密封袋 1个
大鼠elisa试剂盒试剂的准备及样品的收集

1、试剂的准备孔板(条或孔)和阳性和阴性质控临用前取出,应在室温下放置至少半小时。不使用的微孔板应置于2-8°C保存,剩余的阳性和阴性质控应放回原处冰冻保存。

2、切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻吧保存备用,标本融化后仍然吧保持2-8℃的温度,加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或匀浆器讲标本匀浆充分。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。
大鼠elisa试剂盒注意事项:
1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。
2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。
3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。
4. 请每次测定的同时做标准曲线,做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔*孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请zui后乘以总稀释倍数(×n×5)。
5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6.底物请避光保存。
7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9.本试剂不同批号组分不得混用。
10. 如与英文说明书有异,以英文说明书为准。

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