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抑制素检测原理介绍

时间:2011/6/7阅读:298
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抑制素是转化生长因子-β超家族成员,分A、B两型,由α亚基分别与βA或βB亚基组成,性腺是其主要来源,能抑制等促卵泡激素垂体后叶激素合成与分泌,调控红系前体细胞增殖。

 

抑制素是一种由女性卵巢颗粒细胞及男性睾丸支持细胞分泌的异二聚体蛋白质激素。它选择性抑制卵泡刺激素(FSH)的分泌,对性腺也有局部旁分泌作用。完整的抑制素分子是一个分子量约为32KD的分子,由两个不同的亚单位(a亚单位和b亚单位)经二硫键连接而成。卵泡液和血清中也可以发现a亚单位。此外,游离的a亚单位与b亚单位没有生物活性。

 

抑制素的二聚体抑制素BELISA使用一对高度特异的抗体,仅与有功能的抑制素B分子特异性结合,不检测体液中的游离a亚单位。抑制素B由a亚单位和bB亚单位组成。抑制素B的主要作用是通过对FSH的负反馈作用调节配子发育。几种已发表的报告均表明,抑制素B可作为一种内分泌标记物,通过对它的检测,可以监测男性或女性的性腺功能。

 

抑制素的检测原理:

DSL-10-84100ACTIVE®InhibinBELISA试剂盒使用酶增强“双位点”“两步”双抗体夹心免疫测定法。在实验中,标准品、质控及待测血清样本都在包被有抗抑制素bB亚单位抗体的微孔板中孵育。孵育及洗板之后,所有孔都加入*标记的抗抑制素a亚单位的检测抗体。再孵育及洗板之后,所有孔加入链霉和素-辣根过氧化物酶结合物。第三次孵育及洗板之后,加入TMB底物孵育。之后加入终止液,zui后用双波长、在450nm及620nm处测吸光度。测得的吸光度与抑制素B的浓度成正比。标准品用于描绘吸光度的标准曲线,待测抑制素B的浓度可从此曲线中读出。

 

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