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分批灭菌操作要点
培养基的分批灭菌就是将配制好的培养基放在发酵罐或其他装置中,通入蒸汽将培养基和所用设备一起进行加热灭菌的过程,通常也称为实罐灭菌。
规模较小的发酵罐往往采用分批灭菌的方法。这种方法不需要其它设备,操作简单易行,故获得较普遍采用。其缺点是加热和冷却所需时间较长,增加了发酵前的准备时间,也就相应地延长了发酵周期,使发酵罐的利用率降低。所以大型发酵罐采用这种方法在经济上是不合理的。同时,分批灭菌无法采用高温短时间灭菌,因而不可避免地使培养基中营养成分遭到一定程度的破坏。但是对于极易发泡或粘度很大难以连续灭菌的培养基,即使对于大型发酵罐也不得不仍然采用分批灭菌的方法。分批灭菌仍被许多工厂采用。
确保设备的严密度是防止染菌的重要因素。因此,在空罐或实罐灭菌前,发酵罐及附属设备必须全面进行严密度检查,在确实无渗漏情况下才开始灭菌。灭菌时应注意温度与气压是否对应。培养基及发酵设备的灭菌包括分批灭菌(也称实罐灭菌或实消)、空罐灭菌(空消)、连续灭菌(连消)和过滤器及管道灭菌等。
分批灭菌不需要专门的灭菌设备,投资少,对设备要求简单,对蒸汽的要求也比较低,且灭菌效果可靠,因此分批灭菌是中小型生产工厂经常采用的一种培养基灭菌方法。
要保证分批灭菌的成功,必须有:(1)内部结构合理(主要是*),焊缝及轴封装置可靠,蛇管无穿孔现象的发酵罐;(2)压力稳定的蒸汽;(3)合理的操作方法。
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