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大鼠肠脂肪酸结合蛋白(iFABP)酶联免疫分析试剂盒实验目的、原理及注意事项

时间:2011-12-7阅读:272
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实验目的

 

本试剂盒用于测定大鼠血清、血浆及相关液体样本肠脂肪酸结合蛋白(iFABP)含量

 

实验原理

 

本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人肠脂肪酸结合蛋白(iFABP)水平。用纯化的人肠脂肪酸结合蛋白(iFABP)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入肠脂肪酸结合蛋白(iFABP)再与HRP标记的肠脂肪酸结合蛋白(iFABP)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过*洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成zui终的黄色。颜色的深浅和样品中的肠脂肪酸结合蛋白(iFABP)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中大鼠肠脂肪酸结合蛋白(iFABP)浓度。

 

注意事项

 
1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。
 
2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。
 
3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。
 
4. 请每次测定的同时做标准曲线,做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔*孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请zui后乘以总稀释倍数(×n×5)。
 
5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
 
6.底物请避光保存。
 
7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
 
8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
 
9.本试剂不同批号组分不得混用。
 
10. 如与英文说明书有异,以英文说明书为准。

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