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可的松ELISA 试剂盒(尿液*)

阅读:638发布时间:2014-4-4

实验原理

样本中的尿液*与辣根过氧化物酶标记的*竞争连结到包被板中的抗*抗体。

温育后,经洗涤,连结的与游离的*分开。加入H2O2和TMB底物液,经一段时间后,生成了颜色,加入终止液终止酶促反应并检测吸光度。计算尿液中*需要一系列的标准品建立标准曲线。样本中尿液*浓度与颜色强度成正相关。

试剂、材料和仪器

提供的试剂和材料

1 *标准品 STD0-STD4

2 孵化缓冲液

  磷酸盐缓冲液

3 酶联物 HRP标记的*

4 包被板,可分拆

5 TMB底物液

6 终止液

7 质控品(低)

8 质控品(高)

仪器

移液器

酶标仪(450nm)

 

实验步骤: 略

 

结果

平均吸光度

计算标准品、样本的平均吸光度值。

标准曲线

以标准品吸光度值为Y轴,相应的浓度为X轴,作出*的拟合曲线(可选择4参数逻辑函数)。

计算结果

将样本的吸光度值插入标准曲线中,则可读出相应的浓度,单位为ng/ml。

计算尿液中*浓度(24h),按以上计算出浓度,然后再乘以24小时内的尿液总体积

ng/ml x 24小时尿液体积(ml)/1000=µg Cortisol/24h

参考值

50—190µg/24h


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