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上海永叶生物科技有限公司
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阅读:638发布时间:2014-4-4
实验原理
样本中的尿液*与辣根过氧化物酶标记的*竞争连结到包被板中的抗*抗体。
温育后,经洗涤,连结的与游离的*分开。加入H2O2和TMB底物液,经一段时间后,生成了颜色,加入终止液终止酶促反应并检测吸光度。计算尿液中*需要一系列的标准品建立标准曲线。样本中尿液*浓度与颜色强度成正相关。
试剂、材料和仪器
提供的试剂和材料
1 *标准品 STD0-STD4
2 孵化缓冲液
磷酸盐缓冲液
3 酶联物 HRP标记的*
4 包被板,可分拆
5 TMB底物液
6 终止液
7 质控品(低)
8 质控品(高)
仪器
移液器
酶标仪(450nm)
实验步骤: 略
结果
平均吸光度
计算标准品、样本的平均吸光度值。
标准曲线
以标准品吸光度值为Y轴,相应的浓度为X轴,作出*的拟合曲线(可选择4参数逻辑函数)。
计算结果
将样本的吸光度值插入标准曲线中,则可读出相应的浓度,单位为ng/ml。
计算尿液中*浓度(24h),按以上计算出浓度,然后再乘以24小时内的尿液总体积
ng/ml x 24小时尿液体积(ml)/1000=µg Cortisol/24h
参考值
50—190µg/24h
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