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技术文章

DNA合成的磷酰二酯法

阅读:626发布时间:2011-10-13

磷酸二酯法的基本原理是将两个分别在5,或3,端带有适当保护基的脱氧核苷酸连接起来,形成一个带有磷酸二酯键的脱氧二核苷酸。所采用的原料是脱氧核苷酸和脱氧单核苷酸,它们都是多功能团的化合物。

因此,为了保证合成反应能够定向地进行,必须将不参加反应的基团用适当的保护基团选择性地保护起来,原则是不论是5’保护基团还是3’保护基团,都要能够用适当的方法消除掉。一端脱保护的二核苷酸分子,又能同另一个带3’保护基团的单核苷酸进行第二次缩合反应,形成一个三核苷酸分子。

这样从缩合反应开始,到保护基团的消除,再进行新一轮缩合反应。如此反复进行多次,直到获得所需长度的寡脱氧核苷酸为止。

 


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