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上海永叶生物科技有限公司
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阅读:720发布时间:2011-10-17
AR的影响因素很多,但zui主要的还是温度和抗原修复液的pH值。
Biddol等(1999)三实验结果已证实,要想获得满意的结果,温度是zui为重要的影响因素。将存档的蜡块作连续切片,利用4种抗原修复介质,其中包括柠檬酸缓冲液、EDTA、Tris盐和金属缓冲液,二十种不同一抗,抗原修复温度采用室温和37~C,时间为8—72h,结果全部为弱阳性或阴性:当然也不能排除将切片浸在缓冲液中更长时间(几个月或几年)可以获得满意结果的可能性。
Shi等(2001)的实验结果也证实,温度与修复时间呈负相关。另外,抗原修复液的:H值也是一个相当重要的影响因素,一般抗原修复液pH值为6.0或8.5。
虽然,抗原修复技术zui主要的影响因素是温度和pH值,但也不能忽视其他的影响因素.例如修复方式、修复介质和修复时间。作者实验室用改进的CSA(催化信号放大)方法检测p331Ncl在胃癌和肝癌中的表达,单独用pH6.0柠檬酸缓冲液(CB)或pH8.0 ED—TA作抗原修复液,其阳性产物极大部分在细胞浆内表达;当CB和EDTA联合应用时,其阳性表达极大部分在核内,阳性率也提高。该结果说明对于个别抗原的检测,尤其是基因产物,抗原修复液的选择也相当重要。
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