（一）材料与试剂配制
1．DEAE52纤维素
2．0.10Mol/L ZnSO4液
ZnSO4•7H2O 2.88g加水至1 000.00ml
3．饱和硫酸铵溶液
4．10％EDTA—Na
5．SephadexG200
6．0.01Mol/L pH7.4PB液
7．0.10Mol/L pH6.4PB液
8．血清
（二）操作方法
1．取血清加等量的0.1Mol/L ZnSO4液，调pH至7.0，室温搅拌1h，离心去沉淀。
2．于上清液中加入等量的饱和硫酸铵溶液，混匀后静置30min或冰箱过夜。
3．10 000r/min离心10min，去上清。
4．取沉淀溶于4ml10％EDTA－Na溶液中。
5．生理盐水中透析除盐。
6．过DE52柱，用0.01Mol/L pH7.4PB液洗脱蛋白（IgG）弃去。
7．换用0.1Mol/L pH6.4PB液洗脱，收集蛋白峰，即为IgA。
8．再过SephadexG200柱，洗液为0.01Mol/L pH7.4PBS（0.14Mol/L NaCl），收集洗脱液测OD280值，取*峰即为纯化IgA。
9．透析、浓缩、鉴定。
分泌型IgA的分离与鉴定
（一）材料与试剂
1．初乳
2．SephadexG200
3．0.10Mol/L pH6.8PB液
4．0.01Mol/L pH7.4PB液
5．DEAE52
（二）操作方法
1．取初乳20ml，10 000rpm离心10min，弃去表面脂肪层及底部的沉淀物。
2．取乳清过SephadexG200柱（柱规格为2.50cm×90cm），以0.10Mol/L pH6.8PB液洗脱，*峰为IgA（含IgG）。
3． 收集乳液，于0.01Mol/L pH7.4PB液中透析。
4． 将透析液浓缩至5mg/ml以上。
5． 过DE52层析柱，用0.01Mol/L pH7.4PB液洗脱，洗下蛋白峰为IgG，弃去。
6． 换用0.10Mol/L pH6.8PB液或0.01Mol/L pH7.4PBS（0.10Mol/L NaCl）液洗脱，
收集洗脱液 ，即为较纯的IgA液。
7． 必要时，可再过一次SephadexG200柱。
8． 浓缩，鉴定
