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技术文章

ELISA检测肾综合征Ag/IgE和Ag/IgD-CIC

阅读:543发布时间:2012-2-18

抗原抗体双特异性CIC是同一抗原与不同Is类型抗体IC的集合。其操作步骤如下:兔抗人ISD用0.1mol/L,pH9.6碳酸盐缓冲液稀释(终浓度分别为5ug/mL与10ug/mL),加入40孔聚苯乙烯反应板,每孔0.2mL,43℃包被过夜。

用洗涤液PBST(0.01mol/LpH7.4PBS含0,05%Tween-20)洗3次,加入1:2稀释的待检血清(稀释液为含10%NCS的PBST),37℃作用2h,洗涤3次。加入适当稀释的HRP标记的兔抗汉坦病毒抗体,37%作用2h,洗涤3次。加入OPD-H202底物液,显色10—15rain,用2mol/H2S04终止反应。将反应板置酶联免疫检测仪读取492nmOD值。以P/N大于或等于2.1为阳性。

临床意义:IsE和IgD两型CIC检出率的动态变化相似,即疾病早期较高,4~8病日达高峰,此后渐降。不同病型肾综合征出血热患者两型CIC检出情况与病情轻重有密切关系,提示此两型CIC参与了对汉坦病毒的清除及免疫病理反应。


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