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酶标抗体的质量鉴定与保存

阅读：498发布时间：2012-4-5

1． 酶活性和抗体效价测定

采用双向免疫扩散法（稀释抗体）和DAB-H2O2 显色反应检测结合物中抗体效价和免疫沉淀线中的酶促反应。

2． 酶量和IgG量

酶量（mg/ml）=OD403 ′0.4

IgG量（mg/ml）=（OD280- OD402 ′0.42）′0.94′0.62

其中，0.42为酶蛋白本身（0.3）及结合戊二醛后增加的OD值，0.94为抗体蛋白与醛化酶结合后，OD280 约增加6%，故乘以0.94。兔IgG的OD280 =1.0时为0.62.

过碘酸钠标记法IgG量（mg/ml）=（OD280- OD402 ′0.3）′0.94′0.62

标记率= OD403 / OD280 =0.3-0.6，即一个抗体分子上结合1-2个HRP分子.标记率可以大于0.6-0.9。OD403 / OD280 =0.4，约相当于E/P=1.0。

酶标抗体的保存

经鉴定合格的酶标抗体，由于硫化物及叠氮化物等可与酶结合，使HRP失活，因此，不能用硫化物及叠氮化物作为防腐剂，可加入等量的60%甘油，小量分装（0.5ml/支），置4℃~-30℃保存。
 

 


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