污水处理设备 污泥处理设备 水处理过滤器 软化水设备/除盐设备 纯净水设备 消毒设备|加药设备 供水/储水/集水/排水/辅助 水处理膜 过滤器滤芯 水处理滤料 水处理剂 水处理填料 其它水处理设备
上海永叶生物科技有限公司
暂无信息 |
阅读:689发布时间:2012-5-12
ID8是中性粒细胞的激活剂和趋化因子;本法通过检测中性粒细胞的迁移距离来反映IL-8活性。
(1)配制2倍浓度的DMEM培养液100mL,其中含20mL的FCS,75mgNaHC03,置48C水浴预温。
(2)配制2%琼脂糖,水浴中保温48℃左右时,与上述2XDMEM等量混匀。
(3)制片(3mlJ片),室温凝固后,放4~C 30~60min进一步凝固,打孔。
(4)分离人外周血中性粒细胞,用DMEM调整细胞浓度为2.5×105/mL,取lOgL细胞悬液加人各组中心孔,上孔分别加10/uL含趋化因子的待检样品及rlL-8或其他阳性对照趋化因子,下孔加lOgLDMEM作阴性对照。
(5)将玻片放湿盒中,37~C温育2h后,甲醇固定30min,瑞氏染液染片并干燥。
(6)显微镜下分别测量细胞从中心孑L边缘朝向样品孔游走的距离(趋化游走距离)及朝向阴性对照孔的游走距离(自发游走距离),趋化活性以趋化指数表示。
为证实样品中趋化效应是IL-8特异的,还需将抗IL-8中和抗体先与待测样品混合,孵育1h后,加入玻片孔中,观察趋化反应。亦可用其他相关抗体阻断试验区别IL-8及其他趋化因子的作用。
环保在线 设计制作,未经允许翻录必究 .
请输入账号
请输入密码
请输验证码
请输入你感兴趣的产品
请简单描述您的需求
请选择省份