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冷泉港实验室发表锌指核酸酶和免疫共沉淀的新Protocol

阅读:888发布时间:2013-8-30

锌指核酸酶是一种人工制做限制性内切酶,通过将锌指DNA结合区与限制性内切酶的DNA切割区融合获得。ZFNs能够用于在多种细胞的基因组中切除大段的片段。8月份在Cold Spring Harbor Protocols杂志上,Jin-Soo Kim和他的合作者发飙了题为《锌指核酸酶诱导的定向染色体缺失分析》一文中,详细介绍了如何在培养的细胞中对因ZFNs表达诱导的染色体缺失进行检测和分析。该方法使得研究人员能够很容易地通过PCR相关实验对ZFN引起的基因组缺失的频率进行检测和评估

  免疫共沉淀是一种用于分离纯化目的蛋白的常用方法。将抗目的蛋白的抗体与细胞提取物一起培养,然后将抗原/抗体结合物从溶液中分离出来即可。这个方法中,制备细胞提取物对试验成功至关重要。必须选择适合免疫共沉淀抗体识别目的蛋白表位的细胞裂解条件。发表在8月份Cold Spring Harbor Protocols杂志上的一篇文章《用于免疫共沉淀细胞的裂解》详细介绍了不同培养方式细胞的裂解条件。这篇文章比较了常用细胞裂解缓冲液和蛋白酶抑制剂的搭配。


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