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溴酚蓝配置方法说明

阅读:4157发布时间:2011-05-23

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溴酚蓝一种pH 指示剂,在pH 3.0~4.6范围,颜色由黄变蓝。常用做电泳指示染料,凝胶中电泳迁移速度在小分子核酸或蛋白质区域。

 

溴酚蓝从乙酸及丙酮混合液中析出者为长六角形棱柱状结晶。近似黄色或浅玫瑰色结晶性粉末,微溶于水及乙醚,溶于乙醇或稀碱液及氨液中呈蓝色。PH变色范围 3.0(黄)~4.6(蓝紫) 微溶于水,易溶于甲醇、乙醇和苯,可自由溶于氢氧化钠溶液,同时形成溴酚蓝钠盐水溶液。

 

溴酚蓝是pH指示剂,pH=3.0时呈黄色,pH=4.6时呈蓝紫色。酸碱指示剂;非水滴定用指示剂,蛋白电泳染色;病毒化验等。 将*磺酰酞悬浮于醋酸中,然后徐徐加入溴,并使溴过量,在搅拌下,于50℃进行反应而得溴酚蓝

 

溴酚蓝有3种配置方法:

1、1%的溴酚蓝:将托盘天平上称取1g溴酚蓝定溶于100ml无水乙醇中,转移入滴瓶中,贴标签备用。

2、0.05%的溴酚蓝 :配western blot用的2*SDS上样缓冲液需要用到0.1%的溴酚蓝,2-DE中溴酚蓝一般也是配成0.1%母液。实际上,溴酚蓝在水中的溶解度不高,直接将0.1g溴酚蓝溶于100ml水是有困难的。下面是其较合适的配制方法: 0.05%的溴酚蓝配制方法:取溴酚蓝0.1g,加0.05mol/L氢氧化钠溶液3.0ml使溶解,再加水稀释至200ml,即得。 变色范围pH2.8~4.6(黄→蓝绿)。只是不知道加入NaOH会不会影响2-DE实验。估计影响不大,因为指示剂用量毕竟很少。

3、1%溴酚蓝 :加1g水溶性钠型溴酚蓝于100ml水中,搅拌或涡旋混合直到*溶解。溴酚蓝其钠盐易溶解在水里。


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