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人可溶性P选择素,人可溶性P选择素elisa试剂盒,人elisa试剂盒操作步骤

阅读:495发布时间:2012-06-25

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    上海天齐生物科技有限公司

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人可溶性P选择素elisa试剂盒人elisa试剂盒操作步骤

1. 标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。

 

32μg/L     5号标准品  150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液

16μg/L     4号标准品  150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液

8μg/L      3号标准品  150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液

4μg/L      2号标准品  150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液

2μg/L      1号标准品  150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液

 

2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品zui终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀

3. 温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。   

4. 配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用

5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。

6. 加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。 

7. 温育:操作同3

8. 洗涤:操作同5

9. 显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.

10. 终止:每孔加终止50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)

测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值) 测定应在加终止液后15分钟以内进行。


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