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ELISA实验操作中常见问题之操作技术的影响

阅读:242发布时间:2012-10-24

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ELISA实验操作中常见问题之操作技术的影响:

 

操作过程的控制:

⑴ 严格按照试剂说明书进行操作。操作前将试剂在室温下平衡3060min

 

⑵ 加样后及时放人孵箱。标本较多时,要分批操作。按说明步骤严格控制操作时间,防止孵育时间人为延长,导致非特异性结合紧附于反应孔周围,难以清洗*。

 

(3)封板温育时,各孔一定要封严,防止阳性标本的液体蒸发,产生周边现象从而导致花板的出现。

 

(4)用洗板机洗板时,保证洗液注满各孔,洗板针畅通,洗完板后在吸水纸选择干净、无或少尘的吸水材料上轻轻拍干:还要防止针口有纤维蛋白或异物,这些异物在洗板的过程中易产生拖带现象而导致花板的出现。

 

(5)合理安排检测量,以免反应板过多造成洗板等待时间长。

 

6)加酶试剂后用吸水纸在酶标板表面轻拭吸干。

 

(7)显色剂尽量在临用前配制,坚持不用过期显色剂,肉眼可见浅蓝色的TMB显色剂不用。

 

(8)加样时保持显色剂不外流;AB液应避免接触金属器械。加终止液时应避免产生气泡。

 

(9)应保证酶标板清洁,整个操作过程中保证酶标板不接触次氯酸。以上的措施可以使花板降至zui低限度。从而提高检测的特异性。并得到更准确、可靠的实验结果。

 

 

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人elisa试剂盒


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