荧光强度:荧光强度(fluorescence intensity)是指荧光色素发射荧光的光量子数,决定荧光色素检测的灵敏度。在一定范围内,激发光越强.荧光也越强,即荧光强度等于吸收光强度乘以荧光效率。所以,选用适当强度的光源作为激发光源和选用适合于被检荧光物质选择性吸收的光谱滤片作为激发滤片,是提高荧光强度的根本方法。ELISA试剂盒
荧光物质的吸收光谱和发射光谱:每种荧光物质的吸收光不仅有一定波长。而且在各波长上的吸收量也不同,从而构成特殊的吸收光谱曲线;发射荧光的情况也是如此。因此,荧光物质在一定条件下有一定的吸收光谱(激发光谱)和发射光谱(荧光光谱),如吖啶橙的吸收光谱(zui大吸收波长)是455nm,其发射波长光谱为450~700nm。因此,吖啶橙与不同细胞成分结合后。可产生橙、黄、红、绿等荧光。了解各种荧光染料的吸收光谱和发射光谱,有利于在观察被检标本时,有效地选择适当的滤片,获得的荧光效果。ELISA试剂盒
荧光稳定性:提高激发光强度固然可以提高荧光强度,但激发光强度不可能无限提高。因为激发光强度超过一定限度时光吸收趋于饱和,而且不可逆地破坏激发态分子,这种现象称光漂白。对于荧光显微镜和激光共聚焦显微镜而言,如光源长时间照射样品。可导致光漂白现象,严重影响检测。解决光漂白问题zui直接的方法:一是降低光照强度,二是使用抗淬灭剂(anti-fade reagent)。ELISA试剂盒