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双抗体夹心法与竞争法测抗原

时间:2015/9/11阅读:505
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1. 双抗体夹心法测抗原

抗体夹心法是检测抗原zui常用的方法,操作步骤如下:

1)将特异性抗体与固相载体联结,形成固相抗体。洗涤除去未结合的抗体及杂质。

2)加受检样本,保温反应。样本中的抗原与固相抗体结合,形成固相抗原抗体复合物。洗涤除去其他未结合物质。

3)加酶标抗体,保温反应。固相免疫复合物上的抗原与酶标抗体结合。*洗涤未结合的酶标抗体。此时固相载体上带有的酶量与样本中受检抗原的量相关。

4)加底物显色。

2.竞争法测抗原

小分子抗原或半抗原因缺乏可作夹心法的两个以上的位点,因此不能用双抗体夹心法进行测定,可以采用竞争法模式。其原理是标本中的抗原和一定量的酶标抗原竞争与固相抗体结合。标本中抗原量含量愈多,结合在固相上的酶标抗原愈少,zui后的显色也愈浅。小分子激素、药物等ELISA测定多用此法。

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