(一)试验原理
细胞被制成分散的悬液后，接种到底物上，能贴壁生长，形成集落。成集落的细胞培养实验是检验培养细胞增殖情况的可靠指标之一，一般认为该方法比生长曲线、分裂指数测定方法的准确性高。
(二)材料
1．待检材料(药物)。
2．细胞培养成层的贴壁细胞(如HeLa细胞等)。
3.试剂1640培养基(含10％小牛血清)、o．25％*、甲醇、吉姆萨染液。
4.器材CO2培养箱、解剖镜、塑料培养皿(3．5 cm)、*。
(三)实验方法
1.将细胞消化成单个细胞悬液，将细胞悬液分瓶培养，分成不加药的对照组和加入不同剂量药物的实验组。
2.根据细胞种类和实验需要，于每个培养皿分别接种100、200或500个细胞。
3.将培养皿置CO2孵箱中，2～3周后取出检查，可见形成集落。用甲醇固定，再用吉坶萨染液染色。
4.用解剖镜计数每个培养皿中的集落数(以50个细胞以上者为一个集落)。
5.计算5个培养皿的集落数均值，再按以下公式计算集落形成百分率。
(四)结果与分析
用对照组和实验组的集落形成百分率作图或绘制成曲线，并进行比较。
(五)注意事项
1．每个培养皿接种的细胞数不宜过多，一般不应超过500个，否则影响计数集落数。
2．为更方便而准确地计数集落数，可先用记号笔将培养皿划分成4个区域，并将集落用笔点出，然后进行计数。
