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大鼠elisa检测试剂盒实验抗体的制备方法

时间:2017/9/7阅读:399
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大鼠elisa检测试剂盒途径的选择决定于抗原的生物学特性和理化特性,如激素、酶、毒素等生物学活性抗原,通常不宜选用静脉打针。
不一样个别对共同抗原的反应性不一样,而且不一样抗原发作免疫反应的能力也有强有弱,因此常常在打针抗原的一起,参与能增强抗原的抗原性物质,以影响机体发作较强的免疫反应,这种物质称为免疫佐剂。
免疫前取等容积*或不*佐剂与免疫原溶液混合,用振荡器混匀成乳状,也可以在免疫前取需求量佐剂置乳钵中研磨,均匀后再边磨边滴参与等容积抗原液(其中加卡介苗3~4mg/ml或不加),加完后再继承研磨成乳剂,滴于冰水上5~10min内*不分散停止。
交叉反应率低,标明抗血清的特异性好,反之则特异性差。
收集的血液置于室温下1h支配,凝聚后,置4℃下,过夜(切勿冰冻)分出血清,离心,4000rpm,10min。
取兔血有两种方法,一是耳缘静脉或耳动脉放血,二是颈动脉入血,也可心脏采血。加强免疫时用不*佐剂,初度免疫时皮下打针百日咳疫苗0.5ml,加强免疫时不必打针百日咳疫苗。
在无菌条件,吸出血清,分装(0.05~0.2ml),贮于-40℃以下冰箱,或冻干后储存。
取动脉或静脉放血时,将兔放入一个特造的木匣或笼内,耳露于箱(笼)外,也可由另一人捉住兔身。
避免丢掉抗原,亦可用一打针器装抗原液,另一打针器装佐剂,二者以聚乙烯塑料管联接,然后二者往复重复抽吸,约数十分钟后即能*乳化。
每2~3周加强免疫一次。
制作方法:按比例将羊毛脂与石蜡油置容器内,用超声波使之混匀,高压灭菌,置4℃下保留备用。
大鼠elisa检测试剂盒特异性是以交叉反应率来标明的。
交叉反应率通常是用比赛抑制曲线来判定的。
若用兔,用纯种新西兰兔,一组三只,兔的体重以2~3kg为宜。
家兔是zui常用以发作抗体的动物,因此这儿首要谈论兔血的收集。
颈动脉放血时,将兔仰卧,固定于兔台,剪去颈部的毛,切开皮肤,显露颈动脉,插管,放血。
不一样浓度的抗原和近似抗原物质分别做比赛抑制曲线,计算各自的联络率(B/T或B/B0),求出各清闲IC50时的浓度,按下列公式计算交叉反应率。二礼拜后,可在另一耳放血。
常春藤皂苷元    465-99-6    20mg    Hederagenin
苯甲酰乌头原碱    466-24-0    10mg    Benzoylaconine
雪上一枝蒿乙素    466-26-2    20mg    Bullatine B
茶黄素    4670-05-7    20mg    Theaflavin
海柯吉宁    467-55-0    20mg    Hecogenin
异土木香内酯    470-17-7    20mg    Isoalantolactone
华蟾毒精    470-37-1    20mg    Cinobufagin
桉叶油醇    470-82-6    20mg    Cineole
甘草次酸; beta-甘草亭酸    471-53-4    20mg    Glycyrrhetinic acid
大鼠elisa检测试剂盒

 

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