大鼠elisa检测试剂盒比色测定抗体含量的方法

目前常用的几种大鼠elisa检测试剂盒方法有：测定抗体的间接法，测定抗原的双抗体夹心法和测定抗原的竞争法等。本实验采用间接法测定单克隆抗体效价。其主要过程为：首先将已知定量抗原吸附在聚苯乙烯微量反应板的凹孔内，加待测抗体，保温后洗涤以除去未结合的杂蛋白质，加酶标抗抗体，保温后洗涤，加底物保温30分钟后，加酸或碱终止酶促反应，用目测或光电。
三、操作步骤
①抗原包被：兔抗人IgG ELISA试剂盒作为抗原，用包被液l：8000稀释，100μL/孔加入聚苯乙烯96孔反应板中。4℃放置过夜。
②洗涤：次日倾去凹孔内的液体，洗涤液洗3次。
③封闭：加l00μL/孔封闭液，室温放置0.5h.
④洗涤：用洗涤液洗3次。
⑤加待测样品(一抗)：将含单克降抗体的细胞培养上清在另-块板上用PBS 连续稀释(按照1：2或1：10)，100μL /孔加到 已包被的板上，每个样品平行做两份，PBS 或空白培养基作为阴性对照，已知样品作为阳性对照。加盖37℃恒温箱温育 1~2h。
⑥洗涤：用洗涤液洗3次。
⑦加酶标抗抗体：兔抗鼠IgG-HRP，用封闭液l ：8000稀释，100μL／孔，加盖37℃恒温箱温育1h。
⑧洗涤：用洗涤液洗5次，蒸馏水洗2次。
⑨显色：加新鲜配制的底物溶液100μL/孔，室温暗处放置5～30min，显示蓝色。
⑩大鼠elisa检测试剂盒终止反应、比色：加50μL/孔终止液。ELISA试剂盒颜色变黄；用酶标仪测定450nm 处各孔的吸光值，阳性反应的zui大稀释度为待测 样品的效价。
    A.C.E. 测序缓冲液  (1X  带颜色)    100ML    测序级    A.C.E. BUFFER 1X, TINTED
    A.C.E. 测序缓冲液  (1X  带颜色)    1L    测序级    A.C.E. BUFFER 1X, TINTED
    A.C.E. 测序缓冲液  (10X)    100ML    测序级    A.C.E. SEQUENCING BUFFER, 10X CONC.
    A.C.E. 测序缓冲液  (10X)    1L    测序级    A.C.E. SEQUENCING BUFFER, 10X CONC.
    A.C.E. 测序缓冲液  (10X)    5L    测序级    A.C.E. SEQUENCING BUFFER, 10X CONC.
    A.C.E. 测序缓冲液  (10X  带颜色)    100ML    测序级    A.C.E. BUFFER 10X, TINTED
    A.C.E. 测序缓冲液  (10X  带颜色)    1L    测序级    A.C.E. BUFFER 10X, TINTED
    A.C.E. 测序缓冲液  (10X  带颜色)    500ML    测序级    A.C.E. BUFFER 10X, TINTED
大鼠elisa检测试剂盒