大鼠elisa检测试剂盒结合物的制备

大鼠elisa检测试剂盒酶标记抗体的制备方法主要有两种，即戊二醛交联法和过碘酸盐氧化法。 （1）戊二醛交联法：戊二醛是一种双功能团试剂，它可以使酶与蛋白质的氨基通过它而联结。碱性磷酸一般用此法进行标记。交联方法一步法、两步法两种。在一步法中戊二醛直接加入酶与抗体的混合物中，反应后即得酶标记抗体。      
ELISA中常用的酶一般都用此法交联。它有操作简便、有效（结合率达60%-70%）和重复性好等优点。缺点是交联反应是随机的，酶与抗体交联时分子间的比例不严格，结合物的大小也不均一，酶与酶，抗体与抗体之间也有可能交联，影响效果。在两步法中，先将酶与戊二醛作用，透析除去多余的戊二醛后，再与抗体作用而形成酶标抗体。也可先将抗体与戊二醛作用，再与酶联结。两步法的产物中绝大部分的酶与蛋白质是以1:1的比例结合的，较一步法的酶结合物更有助于本底的改善以提高敏感度，但其偶联的有效率较一步法低。
（2）过碘酸盐氧化法：本法只适用于含糖量较高的酶。辣根过氧化物酶的标记常用此法。反应时，过碘酸钠将HRP分子表面的多糖氧化为醛基很活泼，可与蛋白质上的氨基形成Schiff氏碱而结合。酶标记物按克分子比例联结，其比例为：酶/抗体=1-2/1。此法简便有效，一般认为是HRPzui可取的标记方法，但也有人认为所有试剂较为强烈，各批实验结果不易重演。    
按以上方法制备的酶结合物一般都混有未结合物的酶和抗体。理论上，结合物中混有的游离酶一般不影响大鼠elisa检测试剂盒中zui后的酶活性测定，因经过*洗涤，游离酶可被除去，并不影响zui终的显色。但游离的抗体则不同，它会与酶标抗体竞争相应的固相抗原，从而减少了结合到固相上的酶标抗体的量。因此制备的酶结合物应予纯化，去除游离的酶和抗体后用于检测，效果更好。纯化的方法很多，分离大分子化合物的方法均可应用。硫酸铵盐析法zui为简便，但效果并不理想，因为此法只能去除留在上清中的游离酶，但相当数量的游离抗体仍与酶结合物一起沉淀而不能分开。用离子交换层析或分子筛分离更为可取，液相层析法可将制备的结合物清晰地分成三个部分：游离酶、游离抗体和纯结合物而取得分离效果，但费用较贵。
300mg    3458-28-4     甘露糖标准品    Mannose
300mg    73816-42-9     磺基水杨酸氯甲烯*标准品    Meclocycline Sulfosalicylate 
300mg    119478-56-7     *标准品    Meropenem 
300mg    110-42-9     癸酸甲酯标准品    Methyl Caprate 
300mg    106-70-7     己酸甲酯标准品    Methyl Caproate 
300mg    111-11-5     辛酸甲酯标准品    Methyl Caprylate 
300mg    124-10-7     肉豆蔻酸甲酯标准品    Methyl Myristate 
300mg    112-39-0     棕榈酸甲酯标准品    Methyl Palmitate 
300mg    1120-25-8     棕榈油酸甲酯标准品    Methyl Palmitoleate
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