第三代辅助生殖技术中胚胎活检技术环节安全性评估

第三代辅助生殖技术中胚胎活检技术环节安全性评估
日前，中科院动物所周琪研究员领导的生殖工程研究组与南京医科大学沙家豪教授实验室合作，研究利用小鼠作为动物模型，按照人PGD胚胎活检操作流程构建了PGD活检小鼠模型，并且对胚胎早期发育、植入率及出生情况进行了研究。通过对子代的生理表型进行长期观察，发现这些小鼠在体重指标上与对照组小鼠存在差异，更重要的是在针对小鼠学习和记忆力的行为学检测中，PGD活检小鼠模型与对照组相比存在显著差异。针对这种表型，采用蛋白质组学的方法，对小鼠脑部蛋白质表达进行了分析。在全部差异蛋白中，约50%蛋白与神经退行性疾病的发生具有密切的关联。活检组小鼠的脱髓鞘病理表型明显增加，在髓鞘切面面积及密度上都与对照组有显著差异。因此，研究提示活检技术有可能诱发子代小鼠的神经退行性疾病发生，有必要增加对辅助生殖技术中相关环节的基础研究，建立规范的操作体系，从而将这种风险降低到zui小。

据悉，第三代辅助生殖技术在1990年获得成功。这项技术主要针对家族遗传病史的人群及高龄产妇，在其胚胎发育早期利用胚胎活检技术去除一个卵裂球，经分子生物学检测后，正常的胚胎将被移入妇女子宫，而异常的胚胎将被弃掉，因此这种技术称之为植入前遗传诊断（Preimplantation Genetic Diagnosis，PGD）技术。这项技术的重要意义在于已经不单单是针对治疗那些不孕不育人群，而是通过这项技术可以提高整体的人口出生质量，提高人口素质。但是针对这项技术开展的基础研究还比较薄弱，特别是针对该技术在子代长期发育中是否存在潜在的风险还没有被阐述。（

21：克隆胚胎干细胞与正常受精胚胎干细胞具有相似发育潜能
近日，北京生命科学研究所（NIBS）高绍荣实验室与北京蛋白质中心等合作在Proteomics杂志在线发表题为“Embryonic stem cells derived from somatic cloned and fertilized blastocysts are post-transcriptionally indistinguishable: A MicroRNA and protein profile comparison”的文章。该文章报道了使用miRNA芯片和蛋白质组技术分析了体细胞克隆胚胎干细胞和正常受精胚胎干细胞在miRNA水平和蛋白质表达水平，证明体细胞克隆胚胎干细胞与正常受精胚胎干细胞在转录后水平高度类似。

体细胞核移植可以利用特异个体的分化细胞构建克隆胚胎从而可能得到病人特异的核移植胚胎干细胞系，已有的报道已经在小鼠和非人灵长类中基于这种技术成功实施了治疗性克隆。但是由于在克隆动物中发现了大量严重的异常表型，导致了人们对于治疗性克隆在安全性上的担心。虽然在转录水平和发育潜力上，克隆与正常受精的胚胎干细胞系没有明显差异，但是在转录后水平上的系统比较还是空白。为了鉴定克隆和正常受精的胚胎干细胞在转录后水平上是否存在差异，我们通过miRNA芯片、2-D DIGE和生物信息学方法，比较了5个克隆和相对应的正常胚胎干细胞系的miRNA和蛋白质的表达丰度。进一步用stem-loop RT-PCR检测特异miRNAs的表达水平，运用质谱分析技术进一步鉴定差异表达蛋白。我们的结果表明，在miRNA和蛋白质表达丰度上，克隆和正常受精的胚胎干细胞是高度类似的，这些结果与它们类似的发育潜力和转录水平是一致的，进一步证明克隆胚胎干细胞和正常受精来源的胚胎干细胞具有高度类似的治疗潜力。