佳和试剂-牛抗苗勒管激素（AMH）ELISA试剂盒产品信息

          佳和试剂-牛抗苗勒管激素（AMH）ELISA试剂盒产品信息

产品类型：ELISA试剂盒 
　　
　　产品名称：牛抗苗勒管激素（AMH）ELISA试剂盒
　　
　　别名：MIF，MIS，苗勒氏管抑制因子|苗勒氏管抑制物质
　　
　　代码：CSB-E13406B
　　
　　大小：96T
　　
　　种类：牛
　　
　　目标名称：抗苗勒管激素
　　
　　缩写：AMH
　　
　　蛋白质生物过程：发展蛋白质
　　
　　蛋白质生物过程：区别
　　
　　检测范围：0.8ng/ml-200毫微克/毫升
　　
　　灵敏度：0.8纳克/毫升
　　
　　检测时间：1-5H
　　
　　样品体积：50-100ul
　　
　　检测wavelengt：450nm处
　　
　　原理：
　　
　　此法采用定量夹心酶联免疫技术。抗体具体为AMH已经被预先涂到微孔板。标准和样品吸入井，和AMH目前任何被绑定的固定抗体。*共轭的抗体特异性AMH除去任何未结合的物质后，加入到孔中。抗*蛋白共轭的辣根过氧化物酶（HRP）的洗涤后，加入到孔中。经过洗涤，以除去任何未结合的抗*蛋白的酶试剂，底物溶液加入到孔中，并显色的比例AMH量的初始步骤中的约束。彩色显影被停止并测量的颜色的强度。
　　
　　Specificty：
　　
　　此法具有灵敏度高，特异性好，检测牛肾上腺髓质增生。牛肾上腺髓质增生及类似物之间并无重大交叉反应或干扰进行了观察。
　　
　　精度：
　　
　　批内精密度（内检测精度）：CV％<8％
　　
　　三种已知浓度的样品进行了测试20次在一个平板上进行评估。
　　
　　间精密度（精密检测间）：CV％<10％
　　
　　已知的三个样本20检测到的浓度进行了测试评估。
　　
　　样品采集和存储：
　　
　　血清：使用血清分离管（SST）和全血标本在室温下两小时或4℃过夜℃，然后离心15分钟，在1000×g下。删除上清即可检测，或分装和店内样品在-20°C或-80°C。但应避免反复冻融循环。
　　
　　等离子：采集血浆中EDTA或肝素作为抗凝血剂。在2-8°C在30分钟内收集离心15分钟，1000×G。即可检测，或分装保存样本在-20°C或-80°C。但应避免反复冻融循环。
　　
　　检测程序：
　　
　　在使用前，将所有试剂和样品室温。再次离心样品解冻后测定前。据建议，所有样品和标准来测定一式两份。
　　
　　1。准备好所有试剂，工作标准和样品在前面的章节中。
　　
　　2。请确定井数的使用，并把任何剩余的井和入袋干燥剂，密封保鲜袋，将未使用的井在4°C的含量布局表
　　
　　。每孔加入100μl的标准和样品。封面用胶粘带提供。孵育2小时，在37℃下一盘布局记录标准和样品检测。
　　
　　4。每孔中取出的液体，不洗。
　　
　　5。向每孔中加入100μl*抗体（1倍）。盖上一个新的胶粘带。孵育1小时，在37℃下（*抗体（1X）可能会出现混浊。预热至室温，轻轻混匀，直到出现均匀解决方案。）
　　
　　6。吸液的各孔和洗涤，共洗涤三次重复该过程两次。洗净，每孔填充洗涤缓冲液（200μL）使用喷瓶，多道移液器，歧管器，或autowasher，和，静置2分钟，*清除液体的每一步是*的良好的性能。zui后一次洗涤后，清除任何剩余洗涤缓冲液的吸ordecanting。倒置板和涂抹对干净的纸巾。
　　
　　7。向每孔中加入100μl的HRP-抗*蛋白（1×）。量的微量滴定板，用一个新的粘接剂条。温育1小时，在37℃下
　　
　　8。重复的愿望/洗涤过​​程中，在步骤6的5倍。
　　
　　9。将90μlTMB底物添加到每个孔中。孵育15-30分钟，在37℃下避光
　　
　　10。一站式解决方案，每孔加入底物，轻轻晃动酶标板，以确保充分混合。
　　
　　11。在5分钟内，设置至450nm，使用酶标仪测定各孔的光密度。如果波长校正，设置为540nm或570nm处。在540nm或570nm波长在450nm处的读数减去读数。该减法校正板的光学缺陷。在450nm处未经修正读数直接，可能会比较高，不太准确。
　　
　　计算结果：
　　
　　建议使用专业的软“曲线专家1.3”的标准曲线，这可以从我们的下载。
　　
　　平均每个标准和样品的重复读数和平均减去零标准的光学密度。
　　
　　标准曲线，通过减少使用能产生四参数逻辑（4-PL）的曲线拟合的计算机软件的数据。作为一种替代方法，建立标准曲线，对在y-轴的浓度通过绘制在x-轴为每个标准的平均吸光度，并绘制一个通过在曲线图上的点的*拟合曲线。该数据可以通过绘制日志的AMH浓度与日志的OD和可以通过回归分析确定的*拟合线线性化。此过程会产生足够的，但不太的适合的数据。