豚鼠肿瘤坏死因子α（TNF-Α）ELISA试剂盒说明

豚鼠肿瘤坏死因子α（TNF-Α）ELISA试剂盒说明

本试剂盒仅供研究使用

检测值范围： 0-600pg/ml

敏感度:1.0pg/ml

试验原理：豚鼠肿瘤坏死因子TNF-Α试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验（ELISA）已知TNF-Α浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将TNF-Α和*标记的抗体同时温育。洗涤后，加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤，去除未结合的酶结合物，然后加入底物A、B，和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中TNF-Α的浓度呈比例关系。

操作注意事项：试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器。使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。底物A应挥发，避免长时间打开盖子。底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。避免用手接触，有毒。实验完成后应立即读取OD值。加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应板孔温育的时间一样。按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。

安全性：避免直接接触终止液和底物A、B，一旦接触到这些液体，请尽快用水冲洗。实难中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。

豚鼠肿瘤坏死因子TNF-Α试剂盒性能：

1.灵敏度：zui小的检测浓度小于1号标准品。稀释度的线性。样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990。

2.特异性：不与其它细胞因子反应。

3.重复性：板内、板间变异系数均小于10%。 

结果判断分析：仪器值：于波长450nm的酶标仪上读取各孔的OD值，以吸光度OD值为纵坐标（Y），相应的TNF-Α标准品浓度为横坐标（X），做得相应的曲线，样品的TNF-Α含量可根据其OD值由标准曲线换算出相应的浓度，再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的回归方程式，将样品的OD值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。