总结大鼠elisa检测试剂盒实验操作程序

大鼠elisa检测试剂盒实验开始前，各试剂均应平衡至室温（试剂不能直接在37℃溶解）；试剂或样品稀释时，均需混匀，混匀时尽量避免起泡。实验前应预测样品含量，如样品浓度过高时，应对样品进行稀释，以使稀释后的样品符合elisa试剂盒的检测范围，计算时再乘以相应的稀释倍数。
1.加样：分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl，余孔分别加标准品或待测样品100μl，注意不要有气泡，加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀，酶标板加上盖或覆膜，37℃反应120分钟。为保证实验结果有效性，每次实验请使用新的标准品溶液。
2.弃去液体，甩干，不用洗涤。每孔加检测溶液A工作液 100μl（在使用前一小时内配制），酶标板加上覆膜, 37℃反应60分钟。
3.温育60分钟后，弃去孔内液体，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分钟，大约400μl/每孔，甩干（也可轻拍将孔内液体拍干）。
4.每孔加检测溶液B工作液（同检测A工作液） 100μl，酶标板加上覆膜37℃反应60分钟。
5.温育60分钟后，弃去孔内液体，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分钟，350μl/每孔，甩干（也可轻拍将孔内液体拍干）。
6.依序每孔加底物溶液90μl，酶标板加上覆膜37℃避光显色（30分钟内，此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度兰色，后3-4孔梯度不明显，即可终止）。
7.大鼠elisa检测试剂盒依序每孔加终止溶液50μl，终止反应，此时蓝色立转黄色。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性，底物反应时间到后应尽快加入终止液。
8.用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度（OD值）。 在加终止液后立即进行检测。
Medroxyprogesterone Acetate    YSRIBIO756    71-58-9     200mg    *标准品
Medrysone    YSRIBIO755    2668-66-8     500mg    甲羟松标准品
Mefenamic Acid     YSRIBIO754    61-68-7     200mg    **标准品
Mefloquine Hydrochloride     YSRIBIO753    51773-92-3     100mg    盐酸*标准品
Mefloquine Related Compound A    YSRIBIO752        20mg    *相关物质A标准品
Megestrol Acetate     YSRIBIO751    595-33-5     500mg    *标准品
Meglumine (AS)    YSRIBIO750    6284-40-8     500mg    *标准品
Melatonin     YSRIBIO749    73-31-4     100mg    褪黑素标准品
Melengestrol Acetate     YSRIBIO748    2919-66-6     125mg    美仑孕酮醋酸酯标准品
大鼠elisa检测试剂盒