在金标检测试剂盒实验的操作中有很多步骤,每一步都很重要,今天就介绍一下elisa试剂盒显色的重要性。
显色是ELISA中的zui后一步温育反应,此时酶催化无色的底物生成有色的产物。反应的温度和时间仍是影响显色的因素。在一定时间内,阴性孔可保持无色,而阳性孔则随时间的延长而呈色加强。适当提高温度有助于加速显色进行。在定量测定中,加入底物后的反应温度和时间应按规定力求准确。定性测定的显色可在室温进行,时间一般不需要严格控制,有时可根据阳性对照孔和阴性对照孔的显色适当缩短或延长反应时间,及时判断。
OPD底物显色一般在室外温或37℃反应20-30分钟后即不再加深,再延长反应时间,可使本底值增高。OPD底物液受光照会自行变色,显色反应应避光进行,显色反应结束时加入终止液终止反应。OPD产物用酸终止后,显色由橙黄色转向棕黄色。
TMB受光照的影响不大,可在室温中置于操作台上,边反应观察结果。但为保证实验结果的稳定性,宜在规定的适当时间阅读结果。TMB经HRP作用后,约40分钟显色达,随即逐渐减弱,至2小时后即可*消退至无色。TMB的终止液有多种,金标检测试剂盒叠氮钠和SDS等酶抑制剂均可使反应终止。这类终止剂尚能使蓝色维持较长时间(12-24小时)不褪,是目视判断的良好终止剂。此外,各类酸性终止液则会使蓝色转变成黄色,此时可用特定的波长(450nm)测读吸光值。
500mg 63-74-1 磺胺熔点标准物标准品
500mg 66-75-1 乌拉莫司汀标准品
500mg 6700-34-1 氢溴酸右*标准品
500mg 84494-72-4 顺—二十二碳六烯酸乙酯标准品
500mg 86227-47-6 二十烷五烯酸乙酯标准品
500mg 纯化葡萄籽低聚原花青素标准品
Methyl Linoleate 5×50mg 112-63-0 *甲酯标准品
Methyl Linolenate 5×50mg 301-00-8 亚麻酸甲酯标准品
Insulin Lispro 5.97mg 133107-64-9 赖脯胰岛素标准品(2-8℃)
5.25oz 氟化牙粉:单氟磷酸钠(1500 ppm)/二氧化硅标准品
5.25oz "
氟化牙粉:单氟磷酸钠(1000 ppm)/二氧化硅标准品
5 vials 50-56-6 羟可待酮标准品
金标检测试剂盒