兔乳腺成纤维细胞-上海莼试生物技术有限公司

规格	5×105Cells/T25培养瓶	组织来源	乳腺组织
货号	CS-X2782	细胞形态	成纤维细胞样

产品信息：

货号	CS-X2782	组织来源	乳腺组织
传代特性	可传5代左右；3代以内状态	培养基	含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
细胞形态	成纤维细胞样	生长特性	贴壁
培养条件	气相：空气，95%；CO2，5%	换液频率	每2-3天换液一次

兔乳腺成纤维细胞

商品介绍：

产品名称：兔乳腺成纤维细胞
2.组织来源：乳腺组织

3.产品规格：5×105cells/T25细胞培养瓶

4.细胞简介：

兔乳腺成纤维细胞分离自乳腺组织；乳腺位于皮下浅筋膜的浅层与深层之间，浅筋膜伸向乳腺组织内形成条索状的小叶间隔，一端连于胸肌筋膜，另一端连于皮肤，将乳腺腺体固定在胸部的皮下组织之中。乳腺是哺乳动物少数可以重复经历生长、功能分化和退化过程的器官之一。纤维结缔组织伸入乳腺组织之间，形成许多间隔，这些纤维结缔组织对乳房起固定作用，而纤维结缔组织是由成纤维细胞构成的。成纤维细胞（Fibroblast）是疏松结缔组织的主要细胞成分，由胚胎时期的间充质细胞分化而来。成纤维细胞较大，轮廓清楚，多为突起的纺锤形或星形的扁平状结构，其细胞核呈规则的卵圆形，核仁大而明显。成纤维细胞功能活动旺盛，细胞质嗜弱碱性，具明显的蛋白质合成和分泌活动，在一定条件下，它可以实现跟纤维细胞的互相转化；成纤维细胞对不同程度的细胞变性、坏死和组织缺损的修复有着十分重要的作用。刚分离的乳腺成纤维细胞呈圆形、折光性良好，悬浮于培养基中。30min细胞贴壁，其中部分开始伸出伪足，表现为小的突起；6h后细胞基本贴壁，伸展成梭形，胞核清晰，分布较均匀，散在生长，不聚集成团；细胞生长迅速，5-7天即呈融合状态，细胞排列紧密，有的交叉重叠生长，平坦、胞体较大，细胞质透明，细胞核较大，呈椭圆形，颜色淡。细胞融合，并彼此连接成网状；细胞呈突起的纺锤形或星形的扁平分布。

5.方法简介：

公司实验室分离的兔乳腺成纤维细胞采用yi蛋白酶-胶原酶混合消化法结合差速贴壁法制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。

6.质量检测：

公司实验室分离的兔乳腺成纤维细胞经Vimentin免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

7.培养信息：

培养基含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率每2-3天换液一次

生长特性贴壁

细胞形态成纤维细胞样

传代特性可传5代左右；3代以内状态

消化液 0.25%yi蛋白酶

培养条件气相：空气，95%；CO2，5%

细胞保存方法：

（一）细胞冻存

1. 配制含10%DMSO或甘油、10～20%小牛血清的冻存培养液；

2. 取对数生长期的细胞，去除旧培养液，用PBS清洗。

3. 去除PBS，加入适量（覆盖培养皿表面）把单层生长的细胞消化下来；

4. 离心1000rpm，5min；

5. 去除，加入适量配制好的冻存培养液，用吸管轻轻吹打使细胞均匀，计数，调节冻存液中细胞的最终密度为5×106/ml～1×107/ml；

6. 将细胞分装入冻存管中，每管1～1.5 ml；

7. 在冻存管上标明细胞的名称，冻存时间及操作者；

8. 冻存：标准的冻存程序为降温速率-1～-2℃/ min；当温度达-25℃以下时，可增至-5℃～-10℃/min；到-100℃时，则可迅速浸入液氮中。也可将装有细胞的冻存管放入-20℃冰箱2h ，然后放入-70℃冰箱中过夜，取出冻存管，移入液氮容器内。

兔乳腺成纤维细胞

注意事项：

1）、欲冷冻保存之细胞应在生长良好且存活率高之状态，约为80～90%致密度。冷冻前检测细胞是否仍保有其性质，应在冷冻保存前一至二日测试是否有抗体之产生。

2）、细胞在液氮中可长期冻存无，而不会影响细胞活力;在-70度可保存数月。

3）、注意冷冻保护剂之品质。DMSO应为试剂级等级，无菌且无色(以0. 22micron FGLP Telflon过滤或是直接购买无菌产品，如Sigma D-2650)，以5～10 ml小体积分装，4 ℃避光保存，勿作多次解冻。Glycerol亦应为试剂级等级，以高压蒸汽灭菌后避光保存。在开启后一年内使用，因长期储存后对细胞会有毒性。本方法中先制备双倍冻存液，可避免DMSO直接加入时释放的热量对细胞的损伤。缓慢逐滴加入细胞悬液是使细胞逐步适应高渗，可降低细胞受损。DMSO可能引起部分白血病细胞株的分化，可换用10%甘油冻存。

公司正在出售的产品：

兔软骨细胞	人梅毒螺旋体(TP)抗体(IgM)试剂盒ELISA
人神经星形胶质细胞	人载脂蛋白A5(apo-A5)试剂盒elisa
人肾足突细胞	人可溶性弹性蛋白片段(sELAF)检测试剂盒
人胎盘间充质干细胞	鸡弓形虫循环抗原(TCA)试剂盒ELISA
人外周血树突状细胞(DC细胞)	传染性脾肾坏死病病毒PCR试剂盒
人小气道平滑肌细胞	霍乱弧菌通用PCR试剂盒
人牙周膜成纤维细胞	塔那痘病毒PCR检测试剂盒
人支气管成纤维细胞	绵羊星状病毒型PCR检测试剂盒
人椎间盘纤维环细胞	滑液支原体PCR试剂盒
兔成骨细胞	蛇形隐孢子虫PCR试剂盒
兔骨髓单核细胞	松鼠猴疱疹病毒PCR检测试剂盒
兔气管平滑肌细胞	黄热病病毒疫苗株PCR检测试剂盒
兔角膜基质细胞	兔乳腺成纤维细胞化脓隐秘菌PCR试剂盒
兔血管外膜成纤维细胞	四辐射鸟圆线虫PCR检测试剂盒
兔椎间盘纤维环细胞	极细密螺旋体PCR检测试剂盒

操作步骤：

1）、冷冻前24-48小时更换半量或全量培养基，使细胞处于指数生长期。

2）、配制冷冻保存溶液(使用前配制)：另取一离心管，加入培养基、血清，逐滴加入二甲基亚砜 (DMSO)至20%浓度，即制成双倍的冻存液，置于室温下待用。

3）、离心收集培养之细胞，用加血清的培养基重悬起细胞，取少量细胞悬浮液(约0. 1 ml)计数细胞浓度及冻前存活率。

4）、取与细胞悬液等量的冻存液，缓慢逐滴加入细胞悬液，并晃动试管，制成细胞冻存悬液(DMSO后浓度为5～10%)，使细胞浓度为1～5×106cells/ ml，混合均匀，分装于已标示之冷冻保存管中，1～2 ml/vial，并取少量细胞悬浮液作污染检测。严密封口后，注明细胞名称、代数、日期。然后进行冻存。