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货号 | CS-X2749 | 规格 | 5×105Cells/T25培养瓶 |
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生长特性 | 贴壁 | 组织来源 | 呼吸道 |
细胞保存方法:
(一)细胞冻存
1. 配制含10%DMSO或甘油、10~20%小牛血清的冻存培养液;
2. 取对数生长期的细胞,去除旧培养液,用PBS清洗。
3. 去除PBS,加入适量(覆盖培养皿表面)把单层生长的细胞消化下来;
4. 离心1000rpm,5min;
5. 去除,加入适量配制好的冻存培养液,用吸管轻轻吹打使细胞均匀,计数,调节冻存液中细胞的最终密度为5×106/ml~1×107/ml;
6. 将细胞分装入冻存管中,每管1~1.5 ml;
7. 在冻存管上标明细胞的名称,冻存时间及操作者;
8. 冻存:标准的冻存程序为降温速率-1~-2℃/ min;当温度达-25℃以下时,可增至-5℃~-10℃/min;到-100℃时,则可迅速浸入液氮中。也可将装有细胞的冻存管放入-20℃冰箱2h ,然后放入-70℃冰箱中过夜,取出冻存管,移入液氮容器内。
产品信息:
货号 | CS-X2749 | 组织来源 | 呼吸道 |
传代特性 | 可传2-3代 | 培养基 | 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等 |
细胞形态 | 上皮细胞样 | 生长特性 | 贴壁 |
培养条件 | 换液频率 | 每2-3天换液一次 |
商品介绍:
产品名称:人呼吸道上皮细胞 3.产品规格:5×105cells/T25细胞培养瓶 4.细胞简介: 人呼吸道上皮细胞分离自呼吸道;呼吸道是肺呼吸时气流所经过的通道,有肺脊椎动物的呼吸道分上、下两部:鼻、咽和喉合称上呼吸道。气管及其以后一分再分的管道,合称为下呼吸道,或称为气管树。气管树是随着动物的进化逐渐复杂化的。整个呼吸道内表面都分布有分泌液和纤毛(鼻孔、咽后壁和声带黏膜除外),它能温暖(或冷却)、湿润和净化吸入的空气,对于呼吸器官和机体有着保护作用。呼吸道以骨或软骨做支架,其内表面覆盖着黏膜,黏膜内分布着丰富的毛细血管。呼吸道上皮细胞属于假复层纤毛柱状上皮,分布于呼吸道的内表面,主要由柱状,杯形,梭形和锥形等不同形状细胞组成。看上去像复层上皮,但实际上所有细胞底部均附于基膜上,属单层上皮,故称假复层柱状上皮,上皮表面有纤毛,杯状细胞可分泌粘液,包裹着大量细菌,借助纤毛不断摆动将其慢慢移动至出消化道。 5.方法简介: 公司实验室分离的人呼吸道上皮细胞采用yi蛋白酶-胶原酶混合消化法结合差速贴壁法,并通过上皮细胞专用培养基培养筛选制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。 6.质量检测: 公司实验室分离的人呼吸道上皮细胞经PCK免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。 7.培养信息: 包被条件 鼠尾胶原Ⅰ(2-5μg/cm2) 培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等 换液频率 每2-3天换液一次 生长特性 贴壁 细胞形态 上皮细胞样 传代特性 可传2-3代 消化液 0.25%yi蛋白酶 培养条件 气相:空气,95%;CO2,5% |
操作步骤:
1)、冷冻前24-48小时更换半量或全量培养基,使细胞处于指数生长期。
2)、配制冷冻保存溶液(使用前配制):另取一离心管,加入培养基、血清,逐滴加入二甲基亚砜 (DMSO)至20%浓度,即制成双倍的冻存液,置于室温下待用。
3)、离心收集培养之细胞,用加血清的培养基重悬起细胞,取少量细胞悬浮液(约0. 1 ml)计数细胞浓度及冻前存活率。
4)、取与细胞悬液等量的冻存液,缓慢逐滴加入细胞悬液,并晃动试管,制成细胞冻存悬液(DMSO后浓度为5~10%),使细胞浓度为1~5×106cells/ ml,混合均匀,分装于已标示之冷冻保存管中,1~2 ml/vial,并取少量细胞悬浮液作污染检测。严密封口后,注明细胞名称、代数、日期。然后进行冻存。
注意事项:
1)、欲冷冻保存之细胞应在生长良好且存活率高之状态,约为80~90%致密度。冷冻前检测细胞是否仍保有其性质,应在冷冻保存前一至二日测试是否有抗体之产生。
2)、细胞在液氮中可长期冻存无,而不会影响细胞活力;在-70度可保存数月。
3)、注意冷冻保护剂之品质。DMSO应为试剂级等级,无菌且无色(以0. 22micron FGLP Telflon过滤或是直接购买无菌产品,如Sigma D-2650),以5~10 ml小体积分装,4 ℃避光保存,勿作多次解冻。Glycerol亦应为试剂级等级,以高压蒸汽灭菌后避光保存。在开启后一年内使用,因长期储存后对细胞会有毒性。本方法中先制备双倍冻存液,可避免DMSO直接加入时释放的热量对细胞的损伤。缓慢逐滴加入细胞悬液是使细胞逐步适应高渗,可降低细胞受损。DMSO可能引起部分白血病细胞株的分化,可换用10%甘油冻存。
公司正在出售的产品:
小鼠肠黏膜上皮细胞 | 人内皮su2(EDN2)试剂盒ELISA |
Sf9 (昆虫卵巢细胞) | 人龙(PS)试剂盒ELISA |
SK-MEL-1 (人皮肤黑色素瘤细胞) | 人粒细胞集落刺激因子(CSF3)抗体ELISA检测试剂盒 |
SNB-19 (人胶质瘤细胞) (U-251 MG污染细胞系,暂不供应) | 鸡白介su6(IL-6)ELISA检测试剂盒 |
ST (猪睾丸细胞) | 疱疹病毒PCR试剂盒 |
SW 1990 (人胰腺癌细胞) | 甲型流感()病毒H1N2亚型RT-PCR试剂盒 |
SW839(人肾癌细胞) | 解没食子suan链球菌PCR检测试剂盒 |
TCCSUP (人膀胱癌细胞) | 星状诺卡菌PCR检测试剂盒 |
TM4 (正常小鼠睾丸Sertoli细胞) | 红花探针法PCR鉴定试剂盒 |
U251 (人胶质瘤细胞) | 使君子探针法PCR鉴定试剂盒 |
VCaP (人前列腺癌细胞) | 泰泽隐孢子虫PCR检测试剂盒 |
大鼠NG2细胞 | 呼吸道合胞病毒PCR检测试剂盒 |
WI38/VA13 (SV-40Z转化肺成纤维细胞) | 人呼吸道上皮细胞猴病毒40PCR试剂盒 |
大鼠肠巨噬细胞 | 炭疽杆菌PCR检测试剂盒 |
大鼠肺成纤维细胞 | 猪痘病毒PCR检测试剂盒 |
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