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英文简称 | NT-4 ELISA Kit | 货号 | CS-1562E |
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规格 | 48T/96T | 保存温度 | 2-8℃ |
包装类型 | 盒装液体 | 发货地 | 上海 |
实验原理:
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中NT-4 兔子神经营养因子4。用纯化的NT-4 兔子神经营养因子4抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加NT-4 兔子神经营养因子4,再与 HRP 标记的NT-4 兔子神经营养因子4抗体结合,形成抗体抗原-酶标抗体复合物,经过洗涤后加底物 TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的NT-4 兔子神经营养因子4呈正相关。用酶标仪在 450nm 波长下测定吸光度(OD 值),通过标准曲线计算样品中NT-4 兔子神经营养因子4浓度。
商品属性:
产品名称 | NT-4 兔子神经营养因子4elisa试剂盒 | 英文名称 | NT-4 ELISA Kit |
货号 | CS-1562E | 规格 | 48T/96T |
实验目的:
本试剂盒用于测定血清、血浆、组织匀浆及相关液体样本中诱导型一氧化氮合成酶NT-4 兔子神经营养因子4的含量。
图
检测原理:
1. 抗原-抗体反应
ELISA的基础是抗原-抗体反应。抗原是一种能够与抗体结合的物质,而抗体则是免疫系统产生的蛋白质,能够识别并结合抗原。抗原-抗体结合是高度特异的,因此ELISA能够准确地检测样本中的抗原或抗体。
2. 酶联免疫吸附试验
在ELISA中,抗原或抗体被吸附在固相载体表面。常用的固相载体包括聚苯乙烯、尼龙等。载体表面经过特殊处理,可以增强其与抗原或抗体的结合能力。将酶标记的二抗加入反应体系中,二抗能够与抗原或抗体结合,形成酶标抗原-抗体复合物。
3. 底物显色反应
在加入底物后,酶标抗原-抗体复合物与底物发生显色反应,产生颜色变化。底物可以是显色剂,也可以是荧光染料。显色反应的强度与抗原-抗体复合物的量成正比,因此可以通过测量光密度值来定量分析样本中的抗原或抗体。
4. 终止反应
显色反应持续一定时间后,需要加入终止液终止反应。终止液可以使酶失活,停止显色反应。终止液一般是酸或碱溶液。
5. 检测与分析
终止反应后,将固相载体放入多功能酶标仪中测量各孔的光密度值。通过标准曲线可以得出样本中抗原或抗体的浓度。标准曲线是通过检测已知浓度的标准品绘制而成的。
注意事项:
1.NT-4 兔子神经营养因子4elisa试剂盒试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡 15-30 分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。
2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。
3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间控制在 5 分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。
4. 请每次测定的同时做标准曲线,做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本 OD 值大于标准品孔一孔的 OD 值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n 倍)后再测定,计算时请最后乘以总稀释倍数(×n×5)。
5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6.底物请避光保存。
7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9.本试剂不同批号组分不得混用。
ELISA技术原理:
以免疫学反应为基础,将抗原、抗体的特异性反应与酶对底物的高效催化作用相结合起来。
1. 抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。
2. 结合在固相载体表面的抗原或抗体仍保持其免疫学活性。
3. 酶标记的抗原或抗体既保留其免疫学活性,又保留酶的活性。
4. 受检标本与固相载体表面的抗原或抗体起反应,再加入酶标记 的抗原或抗体,也通过反应而结合在固相载体上。
5. 此时固相上的酶量与标本中受检物质的量呈一定的比例。
6. 加入酶反应的底物后,底物被酶催化成为有色产物,产物的量 与标本中受检物质的量直接相关,故可根据呈色的深浅进行定 性或定量分析,测定方法具有很高的敏感度(pg-ng/ml水 平),并且重复性好。
商品属性:
英文名称 | NT-4 ELISA Kit | 规格 | 48T/96T |
货号 | CS-1562E | 类别 | 兔elisa试剂盒 |
包 装 | 盒装液体 | 用途 | 仅供科研研究实验 |
操作注意事项:
1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。
2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。
3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。
4.请每次测定的同时做标准曲线,做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔第一孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请最后乘以总稀释倍数(×n×5)。
5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6.底物请避光保存。
7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9.本试剂不同批号组分不得混用。
实验规则:
1、要保证移液枪的准确性,误差不能超过2%,可用水和电子天平进行确定,但有专业人员进行矫正。
2、要配备20ul、50ul、100ul、1000ul和排枪各一支,吸取不同的液体后,要更换枪头,即使是吸取标准品时。
3、要在实验前1小时将试剂盒从冰箱中取出,使各种试剂都恢复到室温,以使结果更稳定。
4、实验时,要使底物避光保存。
5、用枪吸取液体时速度不能太快,以免产生气泡而使吸取量不准确。
6、吸取液体时,要用量程和需要量接近的枪去吸,减少误差。
7、将液体加到酶标孔中时,避免枪头和孔内液体接触,可使枪头上的液滴和孔壁接触,液滴会自然流下去。
8、液体全部加完后,可将酶标板在桌子上平行轻轻晃动30秒,混匀液体,也可以用酶标仪的晃动功能。
9、温浴时,要用不干胶或胶带纸封好酶标板,防止水分的蒸发。
10、洗板时,每次洗液加入后,应静置1分钟,使清洗更加*,没有洗板机时,倒去液体后,要将酶标板在报纸或毛纸上用力拍干。
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