大鼠肠微血管内皮细胞 返回列表页

大鼠肠微血管内皮细胞

2.组织来源：肠组织

3.产品规格：5×105cells/T25细胞培养瓶

4.细胞简介：

大鼠肠微血管内皮细胞分离自肠道组织；肠道指的是从胃幽门至肛的消化管。肠是消化管中最长的一段，也是功能最重要的一段。哺乳动物的肠包括小肠、大肠和直肠3大段。大量的消化作用和几乎全部消化产物的吸收都是在小肠内进行的，大肠主要浓缩食物残渣，形成粪便，再通过直肠经肛排出体外。肠道堪称身体最劳累的器官——每天不停地消化、吸收食物，以提供足够的养分，其实它的功能还远不止此——它还是机体内最大的微生态系统。微血管是极细微的血管，管径平均为6-9μm，连于动、静脉之间，互相连接成网状。微血管壁薄，管径较小，血流很慢，通透性大。其功能是利于血液与组织之间进行物质交换。其管壁主要由一层内皮细胞构成，在内皮外面有一薄层结缔组织。另外还常可见到一种扁而有突起的细胞贴在微血管的管壁外面，称为周细胞。

5.方法简介：

公司实验室分离的大鼠肠微血管内皮细胞采用yi蛋白酶-胶原酶联合消化法结合差速贴壁法、并通过内皮细胞专用培养基培养筛选制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。

6.质量检测：

公司实验室分离的大鼠肠微血管内皮细胞经CD31免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

7.培养信息：

包被条件 PLL（0.1mg/ml），明胶（0.1%）

培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率 每2-3天换液一次

生长特性 贴壁

细胞形态 内皮细胞样

传代特性 可传2-3代

消化液 0.25%yi蛋白酶

培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%

注意事项：

1、收到细胞后，若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染，请立即与我们联系。

2、收到细胞先不开瓶盖，瓶身擦拭酒精后放在培养箱静置2-4小时（视细胞密度而定）稳定细胞状态。接着在倒置显微镜下观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照（建议收细胞时就整体外观拍一张照片，观察培养基的颜色和是否有漏液情况，随后在显微镜下拍下细胞状态，100*，200*各一张），观察记录细胞在运输过程中是否有污染情况。作为我方进行销售依据。

3、由于细胞状态受环境、操作和运输等多方面因素影响，故本公司只保证客户收到细胞后一周内的细胞状态，故客户需要售后时需出示收到细胞的时间证明及客户提供收货时间和发现问题后客服人员沟通的时间证明，期间间隔时间不能大于7天。

4、所有动物细胞均视为有潜在的生物危害性，必须在二级生物安全台内操作，并请注意防护，所有废液及接触过此细胞的器皿需要灭菌后方能丢弃。

操作步骤：

步骤1：从冰箱拿出无血清非程序冻存液，待用

步骤2：离心收集对数生长期的细胞（贴壁细胞消化下来离心，悬浮细胞直接离心，转速1200rpm或250g，时间3min）

步骤3：弃上清，加入适量无血清非程序冻存液，重悬细胞

步骤4：按照1~1.5mL/管的量分装到冻存管中，拧紧管盖，做好标记

步骤5：将冻存管直接移入-80℃冰箱中，24h后转移至液氮长期保存

在没有冻存盒或者非程序冻存液时，可以选择手动梯度降温。但手动梯度降温不适用于所有细胞，且效果不稳定，同样需要先做冻存测试。

细胞处理：

1）冻存细胞的复苏：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入到含4-6mL培养基的离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心3-5min，弃去上清液，培养基重悬细胞。然后将细胞悬液加入含6-8ml培养基的培养瓶（或皿）中37℃培养过夜。第二天显微镜下观察细胞生长情况和细胞密度。

2）细胞传代：如果细胞密度达70%-90%，即可进行传代培养。该细胞为悬浮和轻微的贴壁细胞，传代可以参考以下方法：

1、收集：将培养瓶中的悬浮的细胞收集到离心管中。用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。由于细胞贴壁不牢PBS润洗后细胞会脱落所以PBS也要回收到离心管中。

2、加入0.25％（w / v）0.53 mM EDTA于培养瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL）置于37℃培养箱中消化1-2分钟（难消化的细胞可以适当延长消化时间），然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加入3-4ml含10%FBS的培养基来终止消化。

3、将收集到的悬浮细胞、pbs清洗液中的细胞和消化下来的贴壁细胞以1000rpml离心5min，弃去上清，补加1-2mL培养液后重悬混匀后将细胞悬液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照说明书要求配置的新的培养基以保持细胞的生长活力，后续传代根据实际情况按1:2~1:5的比例进行。

3）细胞冻存:收到细胞后建议在培养前3代时冻存一批细胞种子以备后续实验使用。下面T25瓶为例：

1、细胞冻存时按照细胞传代的过程收集消化好的细胞到离心管中，可使用血球计数板计数，来决定细胞的冻存密度。一般细胞的推荐冻存密度为1×10⁶~1×10⁷个活细胞/ml.

2、1000rpm离心3-5min，去掉上清。用配制好的细胞冻存液重悬细胞 ，按每1ml冻存液含1×10⁶~1×10⁷个活细胞/ml分配到一个冻存管中将细胞分配到冻存管中，标注好名称、代数、日期等信息。

3、将要冻存的细胞置于程序降温盒中，-80度冰箱中过夜，之后转入液氮容器中储存。同时记录好冻存管在液氮容器中的位置以便后续查阅和使用。

公司正在出售的产品：

大鼠肾小管上皮细胞

NCI-H647 (人肺癌细胞)

NEC (人食管癌细胞)

NR8383 [AgC11x3A; NR8383.1] (大鼠肺泡巨噬细胞)

P3/NSI/1-Ag4-1 [NS-1] (小鼠骨髓瘤细胞)

PATU8988 (人胰腺癌细胞)

PC-61 (小鼠杂交瘤细胞CD25)

PUMC-HUVEC-T1(SV40T转化人脐静脉内皮细胞)

RBE (人肝胆管癌细胞)

RK1 (大鼠肾细胞)

RSC96 (大鼠雪旺细胞)

SCaBER (人膀胱鳞癌细胞)

SGC-7901-GFP (人胃腺癌细胞(绿色荧光))

SK-N-AS (人神经母细胞瘤细胞)

SNU-182 (人肝癌细胞)

人空肠弯曲菌(CJ)抗体(IgM)ELISA检测试剂盒

人骨桥su(OPN)试剂盒ELISA

人抗麦胶蛋白抗体(IgG)检测试剂盒

裸鼠甲种胎儿球蛋白/甲胎蛋白(AFP) ELISA检测试剂盒

盖塔病毒RT-PCRPCR试剂盒

衣原体通用PCR试剂盒

蛤弧菌PCR检测试剂盒

杆菌通用PCR检测试剂盒

鸡源性成分PCR试剂盒

肉毒梭状芽孢杆菌E型外毒su基因PCR试剂盒

嗜冷黄杆菌PCR试剂盒

大鼠肠微血管内皮细胞脊髓灰质炎病毒2型PCR检测试剂盒

基孔肯尼雅病毒RT-PCR试剂盒

饰纹汀蛙虹彩病毒PCR检测试剂盒

鲁氏耶尔森菌PCR检测试剂盒