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规格 | 5×105Cells/T25培养瓶 | 组织来源 | 肾组织 |
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货号 | CS-X2923 | 细胞形态 | 内皮细胞样 |
产品信息:
货号 | CS-X2923 | 组织来源 | 肾组织 |
传代特性 | 可传2-3代 | 培养基 | 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等 |
细胞形态 | 内皮细胞样 | 生长特性 | 贴壁 |
培养条件 | 换液频率 | 每2-3天换液一次 |
商品介绍:
产品名称:大鼠肾小球内皮细胞 3.产品规格:5×105cells/T25细胞培养瓶 4.细胞简介: 大鼠肾小球内皮细胞分离自肾组织;肾脏是机体的重要器官,它的基本功能是生成尿液,借以清除体内代谢产物及某些废物、毒物,同时经重吸收功能保留水份及其他有用物质,如葡萄糖、蛋白质、氨基酸、钠离子、钾离子、碳suan氢钠等,以调节水、电解质平衡及维护酸碱平衡。肾脏同时还有内分泌功能,生成肾素、促红细胞生成素、活性维sheng素d3、前列腺素、激肽等,又为机体部分内分泌激素的降解场所和肾外激素的靶器官。肾脏的这些功能,保证了机体内环境的稳定,使新陈代谢得以正常进行。肾小球是肾元中的用于将血液过滤生成原尿的一团毛细血丛,被鲍氏囊所包裹,是尿液形成的重要构造。血液经由入球小动脉进入肾小球。肾小球内的微血管不像其他微血管,汇流入静脉,而是流入出球小动脉。在肾小球内,微血管受到高压,而加速了超滤作用(hyperfiltration)的进行。微血管中的血液经由超滤作用之后,形成滤液,渗入鲍氏囊内。肾小球与鲍氏囊合称为肾小体,肾小球的过滤速率便称为肾小球过滤率。肾小球内皮细胞是一类特殊微血管类型的细胞。细胞为圆形、多角形,单层贴壁生长;细胞质丰富,细胞核为圆形或卵圆形。肾小球内皮细胞被覆于肾小球毛细血管壁腔侧,与血流直接接触,是肾小球滤过膜的第一道屏障,可粘附细菌和白细胞,修复基底膜,并有抗凝、抗血栓的作用;所以,体外培养的肾小球内皮细胞在免疫学和病理生理学领域中具有重要的研究价值。 5.方法简介: 公司实验室分离的大鼠肾小球内皮细胞采用先机械研磨过不锈钢网筛分离得到肾小球、后用胶原酶消化,结合内皮细胞专用培养基培养筛选制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。 6.质量检测: 公司实验室分离的大鼠肾小球内皮细胞经CD31免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。 7.培养信息: 包被条件 PLL(0.1mg/ml),明胶(0.1%) 培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等 换液频率 每2-3天换液一次 生长特性 贴壁 细胞形态 内皮细胞样 传代特性 可传2-3代 消化液 0.25%yi蛋白酶 培养条件 气相:空气,95%;CO2,5% |
细胞保存方法:
(一)细胞冻存
1. 配制含10%DMSO或甘油、10~20%小牛血清的冻存培养液;
2. 取对数生长期的细胞,去除旧培养液,用PBS清洗。
3. 去除PBS,加入适量(覆盖培养皿表面)把单层生长的细胞消化下来;
4. 离心1000rpm,5min;
5. 去除,加入适量配制好的冻存培养液,用吸管轻轻吹打使细胞均匀,计数,调节冻存液中细胞的最终密度为5×106/ml~1×107/ml;
6. 将细胞分装入冻存管中,每管1~1.5 ml;
7. 在冻存管上标明细胞的名称,冻存时间及操作者;
8. 冻存:标准的冻存程序为降温速率-1~-2℃/ min;当温度达-25℃以下时,可增至-5℃~-10℃/min;到-100℃时,则可迅速浸入液氮中。也可将装有细胞的冻存管放入-20℃冰箱2h ,然后放入-70℃冰箱中过夜,取出冻存管,移入液氮容器内。
注意事项:
1)、欲冷冻保存之细胞应在生长良好且存活率高之状态,约为80~90%致密度。冷冻前检测细胞是否仍保有其性质,应在冷冻保存前一至二日测试是否有抗体之产生。
2)、细胞在液氮中可长期冻存无,而不会影响细胞活力;在-70度可保存数月。
3)、注意冷冻保护剂之品质。DMSO应为试剂级等级,无菌且无色(以0. 22micron FGLP Telflon过滤或是直接购买无菌产品,如Sigma D-2650),以5~10 ml小体积分装,4 ℃避光保存,勿作多次解冻。Glycerol亦应为试剂级等级,以高压蒸汽灭菌后避光保存。在开启后一年内使用,因长期储存后对细胞会有毒性。本方法中先制备双倍冻存液,可避免DMSO直接加入时释放的热量对细胞的损伤。缓慢逐滴加入细胞悬液是使细胞逐步适应高渗,可降低细胞受损。DMSO可能引起部分白血病细胞株的分化,可换用10%甘油冻存。
公司正在出售的产品:
小鼠骨骼肌细胞 | 人抗外切mei体复合物成分RRP45(EXOSC9)抗体检测试剂盒 |
小鼠牙乳头细胞 | 人血清/糖皮质激su调节激mei2(GSK2)检测试剂盒 |
小鼠胰腺上皮细胞 | 人抗蛋白mei3抗体IgG(PR3 Ab-IgG)试剂盒ELISA |
小鼠脂肪干细胞 | 人6-羟多巴胺(6-OHDA) ELISA检测试剂盒 |
小鼠子宫成纤维细胞 | 雅氏瓦螨PCR试剂盒 |
猪前脂肪细胞 | 益母草染料法PCR鉴定试剂盒 |
104C1 (转化的豚鼠胎体细胞) | 大肠埃希菌(大肠O)stx(bp)和stx(bp)常规PCR检测试剂盒 |
293T [HEK-293T](人胚肾细胞) | 轮状病毒群PCR检测试剂盒 |
6T-CEM (人T细胞白血病细胞) | 甲型流感()病毒H5N8亚型RT-PCR试剂盒 |
A2780 (人卵巢癌细胞) | 人腺病毒D86型PCR试剂盒 |
Acc-2 (人涎腺腺样囊性癌细胞) | 山羊CYTB基因核suan检测试剂盒 |
B82 (小鼠肿瘤细胞系) | 节菱孢霉属通用PCR检测试剂盒 |
Ana-1 (小鼠巨噬细胞) | 大鼠肾小球内皮细胞贾弟虫PCR检测试剂盒 |
B-CPAP (人甲状腺乳头状癌细胞) | 沙门氏菌和痢疾杆菌PCR联合测定试剂盒 |
BHK-21 [C-13] (仓鼠肾成纤维细胞) | 凋亡抑制蛋白Survivin基因PCR检测试剂盒 |
操作步骤:
1)、冷冻前24-48小时更换半量或全量培养基,使细胞处于指数生长期。
2)、配制冷冻保存溶液(使用前配制):另取一离心管,加入培养基、血清,逐滴加入二甲基亚砜 (DMSO)至20%浓度,即制成双倍的冻存液,置于室温下待用。
3)、离心收集培养之细胞,用加血清的培养基重悬起细胞,取少量细胞悬浮液(约0. 1 ml)计数细胞浓度及冻前存活率。
4)、取与细胞悬液等量的冻存液,缓慢逐滴加入细胞悬液,并晃动试管,制成细胞冻存悬液(DMSO后浓度为5~10%),使细胞浓度为1~5×106cells/ ml,混合均匀,分装于已标示之冷冻保存管中,1~2 ml/vial,并取少量细胞悬浮液作污染检测。严密封口后,注明细胞名称、代数、日期。然后进行冻存。
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