人肝星状细胞-上海莼试生物技术有限公司

规格	5×105Cells/T25培养瓶	组织来源	肝脏组织
货号	CS-X2864	细胞形态	成纤维细胞样

产品信息：

货号	CS-X2864	组织来源	肝脏组织
传代特性	可传3代左右	培养基	含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
细胞形态	成纤维细胞样	生长特性	贴壁
培养条件	气相：空气，95%；CO2，5%	换液频率	每2-3天换液一次

人肝星状细胞

商品介绍：

产品名称：人肝星状细胞
2.组织来源：肝脏组织

3.产品规格：5×105cells/T25细胞培养瓶

4.细胞简介：

人肝星形细胞分离自肝脏组织；肝脏是身体内以代谢功能为主的一个器官，并在身体里面起着去氧化、储存肝糖、分泌性蛋白质的合成等作用；肝脏也制造消化系统中之胆汁。肝脏是机体内脏里最大的器官，位于机体中的腹部位置，在右侧横隔膜之下，位于胆囊之前端且于右边肾脏的前方，胃的上方。肝脏是机体消化系统中最大的消化腺，为一红棕色的V字形器官。肝脏是尿素合成的主要器官，又是新陈代谢的重要器官。肝脏在机体位置和形态结构：肝脏位于右上腹，隐藏在右侧膈下和肋骨深面，大部分肝为肋弓所复盖，仅在腹上区、右肋弓间露出并直接接触腹前壁，肝上面则与膈及腹前壁相接。肝星形细胞（HSC）又名肝贮脂细胞、贮存细胞、窦周细胞、Ito细胞等，是肝脏细胞外基质的主要来源。HSC在激活后可进一步转化为肌成纤维细胞样细胞，各种可导致肝纤维化的因素均将HSC作为最终靶细胞。正常情况下，HSC处于静止状态，当肝脏发生炎症反应或受到机械刺激等损伤时，HSC的表型由静止型转变为激活型，激活的HSC可通过增生和分泌细胞外基质参与肝纤维化的形成及肝内结构的重建，此过程也是肝纤维化的中心环节。肝星形细胞分布于肝脏的Disse间隙内，是合成、分泌细胞外基质的主要来源，在肝纤维化的发生中处于最重要地位。肝星形细胞是肝脏的间充质细胞，约占肝脏细胞总数的8%-13%。作为肝脏合成细胞外基质的主要细胞群，肝星形细胞不仅能分泌蛋白多糖、糖蛋白等细胞外基质成分，合成一定量的胶原酶以维持正常的基底膜结构，还能通过其突起的收缩参与肝窦的微循环调节。此外，肝星形细胞能通过合成肝细胞生长因子、胰岛素样生长因子、表皮生长因子等促进肝细胞增殖和肝再生。

5.方法简介：

公司实验室分离的人肝星形细胞采用混合酶灌流消化、低速离心、密度梯度离心制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。

6.质量检测：

公司实验室分离的人肝星状细胞经α-SMA、Desmin免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

7.培养信息：

培养基含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率每2-3天换液一次

生长特性贴壁

细胞形态成纤维细胞样

传代特性可传3代左右

消化液 0.25%yi蛋白酶

培养条件气相：空气，95%；CO2，5%

细胞保存方法：

（一）细胞冻存

1. 配制含10%DMSO或甘油、10～20%小牛血清的冻存培养液；

2. 取对数生长期的细胞，去除旧培养液，用PBS清洗。

3. 去除PBS，加入适量（覆盖培养皿表面）把单层生长的细胞消化下来；

4. 离心1000rpm，5min；

5. 去除，加入适量配制好的冻存培养液，用吸管轻轻吹打使细胞均匀，计数，调节冻存液中细胞的最终密度为5×106/ml～1×107/ml；

6. 将细胞分装入冻存管中，每管1～1.5 ml；

7. 在冻存管上标明细胞的名称，冻存时间及操作者；

8. 冻存：标准的冻存程序为降温速率-1～-2℃/ min；当温度达-25℃以下时，可增至-5℃～-10℃/min；到-100℃时，则可迅速浸入液氮中。也可将装有细胞的冻存管放入-20℃冰箱2h ，然后放入-70℃冰箱中过夜，取出冻存管，移入液氮容器内。

人肝星状细胞

注意事项：

1）、欲冷冻保存之细胞应在生长良好且存活率高之状态，约为80～90%致密度。冷冻前检测细胞是否仍保有其性质，应在冷冻保存前一至二日测试是否有抗体之产生。

2）、细胞在液氮中可长期冻存无，而不会影响细胞活力;在-70度可保存数月。

3）、注意冷冻保护剂之品质。DMSO应为试剂级等级，无菌且无色(以0. 22micron FGLP Telflon过滤或是直接购买无菌产品，如Sigma D-2650)，以5～10 ml小体积分装，4 ℃避光保存，勿作多次解冻。Glycerol亦应为试剂级等级，以高压蒸汽灭菌后避光保存。在开启后一年内使用，因长期储存后对细胞会有毒性。本方法中先制备双倍冻存液，可避免DMSO直接加入时释放的热量对细胞的损伤。缓慢逐滴加入细胞悬液是使细胞逐步适应高渗，可降低细胞受损。DMSO可能引起部分白血病细胞株的分化，可换用10%甘油冻存。

公司正在出售的产品：

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操作步骤：

1）、冷冻前24-48小时更换半量或全量培养基，使细胞处于指数生长期。

2）、配制冷冻保存溶液(使用前配制)：另取一离心管，加入培养基、血清，逐滴加入二甲基亚砜 (DMSO)至20%浓度，即制成双倍的冻存液，置于室温下待用。

3）、离心收集培养之细胞，用加血清的培养基重悬起细胞，取少量细胞悬浮液(约0. 1 ml)计数细胞浓度及冻前存活率。

4）、取与细胞悬液等量的冻存液，缓慢逐滴加入细胞悬液，并晃动试管，制成细胞冻存悬液(DMSO后浓度为5～10%)，使细胞浓度为1～5×106cells/ ml，混合均匀，分装于已标示之冷冻保存管中，1～2 ml/vial，并取少量细胞悬浮液作污染检测。严密封口后，注明细胞名称、代数、日期。然后进行冻存。