抗氟离子酸性磷酸酶检测试剂盒 返回列表页

抗氟离子酸性磷酸酶检测试剂盒检测缓冲液———————————15ml

显色底物————————————2管

氟离子溶液———————————1ml

p-nitrophenol溶液(10mM)—————0.1ml

反应终止液———————————20ml

酸性磷酸酶也称酸性磷酸酯酶，在酸性条件下可以催化磷酸酯键的水解。酸性磷酸酶是一个蛋白家族，哺乳动物中其分子量从18kD到100kD不等。酸性磷酸酶主要分为两类，一类为抗酒石酸酸性磷酸酶，一类为抗氟离子酸性磷酸酶。

抗氟离子酸性磷酸酶包括在绝大多数细胞的溶酶体中表达的溶酶体酸性磷酸酶、前列腺、脑、肝脏、脾脏和血小板中表达的酸性磷酸酶。抗氟离子酸性磷酸酶在前列腺中的表达水平非常高，当前列腺发生癌变并出现转移时抗氟离子的前列腺特异性酸性磷酸活性水平高。当前列腺发生病变时会导致血液中抗氟离子酸性磷酸酶活性显著升高。同时，血液中检测到抗氟离子酸性磷酸酶活性升高时，通常是前列腺发生病变。因此，血清或血浆中抗氟离子酸性磷酸酶活性水平的升高，常被用作前列腺癌等前列腺病变的指标。溶酶体储存性疾病如Gaucher's disease等，也会导致血液中抗氟离子酸性磷酸酶活性水平一定程度的升高。

Para-nitrophenyl phosphate (pNPP)是一种常用的磷酸酶显色底物，在酸性条件下，可在酸性磷酸酶作用下生成para-nitrophenol。para-nitrophenol (p-nitrophenol)在碱性条件下，呈黄色产物，可以在400-415nm检测吸光度。产物黄色越深，说明酸性磷酸酶检活性越高，反之则酶活性越低。据此通过比色分析就可以计算出酸性磷酸酶活性水平。在适量的氟离子存在的情况下进行酸性磷酸酶的活性检测，检测得到的酸性磷酸酶活性就是抗氟离子酸性磷酸酶活性。

注意事项;

1. 如果希望进行酶活性的定量，进行酶反应时必须注意精确计时。此时推荐采用孵育30分钟等较长的时间，以减小操作过程中的时间误差。同时如果样品中酶活性较高，则可以预先适当稀释样品。

2. 样品溶液中须避免出现各种酸性磷酸酶抑制剂。

3. 一管显色底物配制后需当日使用完毕，因此请注意适当多准备一些样品一起检测，以避免试剂盒浪费。

细胞生物学研究有以下几个方面：

细胞生物学的研究内容十分广泛,主要包括：

①细胞核、染色体以及基因表达的研究；

②生物膜与细胞器的研究；

③细胞骨架体系的研究；

④细胞增殖及其调控；

⑤细胞分化及其调控；

⑥细胞的衰老与编程性死亡(凋亡)；

⑦细胞的起源与进化；

⑧细胞工程.

细胞生物学研究的常用技术有哪些：

1.显微技术：包括显微观察,显微操作.

2细胞组分分析技术：离心分离技术,生物大分子定位技术,定量细胞化学分析技术.

3.细胞工程：细胞培养。

注意事项：

1. 本试剂盒的检测试剂中含有萤光素酶，反复冻融会导致其逐渐失活。尽管经测试本试剂反复冻融5次对于其检测效果无显著影响，为取得良好的使用效果，*次解冻后可适当分装保存。反复冻融过程中，可能会导致检测试剂中出现少量沉淀，此时宜平衡至室温，并尽量溶解。如仍有残留的不溶物，可以离心去除后使用，经测试不会影响后续的检测效果。

2. 检测时需使用白色或黑色的96孔板或384孔板。如果使用普通透明的96孔板或384孔板，相邻孔之间会产生相互干扰。

3. 使用说明中提供了检测ATP标准品的方法，实际检测细胞活力时通常并不需要检测ATP标准品。
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