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当前位置：上海莼试生物技术有限公司>>细胞生物学试剂>>生化测试剂盒>> 活性氧(ROS)检测试剂盒-DCFHDA
| 货号 | CS-C7946 | 货期 | 1～3天 |
|---|---|---|---|
| 规格 | 200T | 用途 | 仅供科研研究实验 |
商品介绍：
DCFH-DA本身没有荧光，可以自由穿过细胞膜，进入细胞内后，可以被细胞内的酯酶水解生成DCFH。而DCFH 不能通透细胞膜，从而使探针很容易被标记到细胞内。在活性氧存在的条件下，DCFH被氧化生成荧光物质DCF，绿色荧光强度与细胞内活性氧水平成正比，检测DCF 的荧光就可以知道细胞内活性氧的水平。
在激发波长502 nm，发射波长530 nm 附近，使用荧光显微镜、激光共聚焦显微镜、荧光分光光度计、荧光酶标仪、流式细胞仪等检测DCF荧光，从而测定细胞内活性氧水平。
本试剂盒可以用于各种真核培养细胞的检测。本试剂盒提供了活性氧阳性对照试剂，以便于活性氧的检测。
储存条件：-20℃保存。
有效期：一年。
商品属性：
货号 | 规格 | 货期 | 英文名称 |
CS-C7946 | 200T | 1～3天 |
步骤和注意事项：
准备实验环境：确保实验区域清洁，使用酒精清洁计数板和盖玻片，然后用吸水纸轻轻擦干。
细胞培养：
准备试管或培养皿、细胞培养基和待培养的细胞。
取出保存于低温下的细胞苗，并加入培养基中，摇晃混合均匀。
用移液管将细胞培养基和细胞种植在试管或培养皿中。
将试管或培养皿放置于恒温培养箱中，定期更换培养液。
细胞冻存与复苏：
细胞系的冻存是将生长较好的传代细胞悬浮在加有冷冻保护剂的溶液中，以一定的冷冻速率降至零下某一温度，并在此温度下对其长期保存的过程。
复苏则是将冻存的细胞系恢复到常温的过程，原则是“慢冻快融"，以较大限度地保存细胞活力。
细胞计数：
制备细胞悬液，使用消化单层培养细胞或收集悬浮培养细胞，制成单个细胞悬液。
在显微镜下，用10×物镜观察计数板四角大方格中的细胞数，细胞压中线时，只计左侧和上方者，不计右侧和下方者。
荧光显微镜使用：
使用荧光染料对细胞进行染色，并观察细胞所发出的荧光信号，以研究细胞结构和功能。
聚合酶链反应（PCR）：
准备PCR反应所需的DNA模板、引物、聚合酶和核苷酸。
按照PCR反应液配制表制备反应液。
在反应器中加入反应液，开始PCR反应。
PCR反应的成功与否，可以通过电泳、测序等方法进一步确认。
转染：
准备转染所需的载体DNA和细胞。
制备转染试剂，将DNA载体溶解于转染试剂中，与细胞混合均匀。
处理转染细胞，并进行下一步实验。
在操作过程中，应注意实验室安全规范，避免随意丢弃垃圾，及时登记购买耗材或试剂，保持实验环境的清洁和安全
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