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货号 | CS-C7672 | 货期 | 1~3天 |
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规格 | 150次 | 用途 | 仅供科研研究实验 |
英文名称 | Hydrogen Peroxide Assay Kit |
商品属性:
货号 | 规格 | 货期 | 英文名称 |
CS-C7672 | 150次 | 1~3天 | Hydrogen Peroxide Assay Kit |
商品介绍:
过氧化氢检测试剂——————15ml
过氧化氢标准溶液(1M)————1ml
过氧化氢检测裂解液—————50ml
过氧化氢是一种活性氧代谢的副产物,在许多氧化应急反应中过氧化氢都是一种关键的调节因子。过氧化氢可以激活NF-κB等因子,这些过氧化氢相关的信号途径和哮喘、炎症性关节炎、动脉硬化以及神经退行性疾病等许多疾病相关。过氧化氢也和细胞凋亡、细胞增殖等密切相关。
本试剂盒通过过氧化氢氧化二价铁离子产生三价铁离子,然后和二甲酚橙在特定的溶液中形成紫色的产物,从而实现对过氧化氢浓度的测定。本试剂盒经过改良配方,可以检测低达1μmol/L的过氧化氢。
注意事项:
1. 一些干扰氧化还原的试剂或在酸性条件下呈紫色或接近的试剂会对过氧化氢的检测产生干扰,需尽量避免。
2. 如果样品中含有外加的较高浓度的铁盐,会干扰测定。但普通培养基、血清等样品中含有的微量的铁盐不会干扰测定。
3. 所测得的标准曲线尽管在一定的浓度范围内接近直线,但整个标准曲线不是直线。
4. 测定时需可以测定A560的酶标仪一台(测540-570nm也可以)或可以测定微量样品的分光光度计一台。
储存条件:-20℃,有效期一年。
步骤和注意事项:
准备实验环境:确保实验区域清洁,使用酒精清洁计数板和盖玻片,然后用吸水纸轻轻擦干。
细胞培养:
准备试管或培养皿、细胞培养基和待培养的细胞。
取出保存于低温下的细胞苗,并加入培养基中,摇晃混合均匀。
用移液管将细胞培养基和细胞种植在试管或培养皿中。
将试管或培养皿放置于恒温培养箱中,定期更换培养液。
细胞冻存与复苏:
细胞系的冻存是将生长较好的传代细胞悬浮在加有冷冻保护剂的溶液中,以一定的冷冻速率降至零下某一温度,并在此温度下对其长期保存的过程。
复苏则是将冻存的细胞系恢复到常温的过程,原则是“慢冻快融",以较大限度地保存细胞活力。
细胞计数:
制备细胞悬液,使用消化单层培养细胞或收集悬浮培养细胞,制成单个细胞悬液。
在显微镜下,用10×物镜观察计数板四角大方格中的细胞数,细胞压中线时,只计左侧和上方者,不计右侧和下方者。
荧光显微镜使用:
使用荧光染料对细胞进行染色,并观察细胞所发出的荧光信号,以研究细胞结构和功能。
聚合酶链反应(PCR):
准备PCR反应所需的DNA模板、引物、聚合酶和核苷酸。
按照PCR反应液配制表制备反应液。
在反应器中加入反应液,开始PCR反应。
PCR反应的成功与否,可以通过电泳、测序等方法进一步确认。
转染:
准备转染所需的载体DNA和细胞。
制备转染试剂,将DNA载体溶解于转染试剂中,与细胞混合均匀。
处理转染细胞,并进行下一步实验。
在操作过程中,应注意实验室安全规范,避免随意丢弃垃圾,及时登记购买耗材或试剂,保持实验环境的清洁和安全
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